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hxswdl至尊木虫 (文坛精英)
Tortoise
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[求助]
pcr 扩不出目的带啊，求帮忙
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以基因组为模板扩得出2500多bp的片段，换引物想再加扩上游的300多bp就怎么也只能出1500bp以下的明亮条带！降低退火温度到50，2500以上有2个靠的很近很暗的带，不好切胶回收！试过降落，最终退火52与60都试过，没用啊！求高手指点！ 还有个问题，用能扩出基因组的引物去扩cdna，一条带都没有！cdna 的polya前面一部分与基因组有差别，用cdna的polya前一部分碱基为下游引物，5'端开始一部分为上游引物，cdna为模板，p出来跑电泳也是空无一物，求解释啊！！（用手机编了一遍 没发成功，现在用电脑，居然还有记录，虫虫好贴心！） |
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