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leonaliu2013

木虫 (著名写手)

[求助] RNA提取中遇到问题

promega试剂盒提取细菌RNA,跑电泳后,rRNA质量很好。DNase I处理37度半小时,跑电泳,RNA依然明亮。65度使酶变性10分钟,跑电泳。没有任何条带。我想知道这是RNA降解了还是RNA变性成单链跑琼脂糖凝胶看不见条带了?反转录第一步也是65度5min,使RNA变成单链,我这个到底是什么情况?

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fudan671

木虫 (著名写手)

4楼2016-02-28 17:32:04
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fudan671

木虫 (著名写手)

2楼2016-02-28 13:24:06
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leonaliu2013

木虫 (著名写手)

引用回帖:
2楼: Originally posted by fudan671 at 2016-02-28 13:24:06
降解

如果65度就降解,那么做RT的第一步就是65度与引物温浴5分钟。即使我不用高温去除DNA酶,而用酚仿醇的话。到了RT第一步岂不还是会降解?
3楼2016-02-28 13:50:18
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