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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 核酸提取 » RNA提取中遇到问题
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leonaliu2013

木虫 (著名写手)

[求助] RNA提取中遇到问题

promega试剂盒提取细菌RNA，跑电泳后，rRNA质量很好。DNase I处理37度半小时，跑电泳，RNA依然明亮。65度使酶变性10分钟，跑电泳。没有任何条带。我想知道这是RNA降解了还是RNA变性成单链跑琼脂糖凝胶看不见条带了？反转录第一步也是65度5min，使RNA变成单链，我这个到底是什么情况？

[ 发自手机版 http://muchong.com/3g ]
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1楼 2016-02-28 12:50:42
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fudan671

木虫 (著名写手)
降解

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2楼2016-02-28 13:24:06
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leonaliu2013

木虫 (著名写手)
引用回帖:
2楼: Originally posted by fudan671 at 2016-02-28 13:24:06
降解

如果65度就降解，那么做RT的第一步就是65度与引物温浴5分钟。即使我不用高温去除DNA酶，而用酚仿醇的话。到了RT第一步岂不还是会降解？
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3楼2016-02-28 13:50:18
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fudan671

木虫 (著名写手)
不会的，

发自小木虫IOS客户端
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4楼2016-02-28 17:32:04
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