求大佬，需要设计引物对目的基因全长扩增
各位大佬，我已提取了质粒，我需要重新构建表达载体进行原核表达，打算购买试剂盒。但是，现在需要以质粒为模板进行PCR扩增，我需要设计引物，但是我用 primer 5 设计的正反引物（都从头开始扩增）所显示的结果都不好，没法用，有没有其他办法能够扩增出我的基因全长。急需大佬指导
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快来大佬哇
解决了吗？
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，
蹲一个后续
软件设计要求很高，挑几对评分高的扩扩试试，有杂带就切胶
换高保真酶和pcr仪器试试 这两个因素也很重要