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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » PCR相关 » 求大佬，需要设计引物对目的基因全长扩增
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fire，

新虫 (初入文坛)

[交流] 求大佬，需要设计引物对目的基因全长扩增 已有7人参与

各位大佬，我已提取了质粒，我需要重新构建表达载体进行原核表达，打算购买试剂盒。但是，现在需要以质粒为模板进行PCR扩增，我需要设计引物，但是我用 primer 5 设计的正反引物（都从头开始扩增）所显示的结果都不好，没法用，有没有其他办法能够扩增出我的基因全长。急需大佬指导
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1楼 2021-04-06 16:59:23
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fire，

新虫 (初入文坛)
快来大佬哇
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2楼2021-04-06 17:02:11
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菲轩

新虫 (职业作家)
解决了吗？

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3楼2021-04-06 23:36:11
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南宫逸轩

新虫 (小有名气)
★
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可以考虑一下切成片段，扩增后再连起来，目的基因太长有时候很容易出问题

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4楼2021-04-08 15:45:04
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匿名

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5楼2021-08-19 23:39:05
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匿名

★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
本帖仅楼主可见
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6楼2021-08-19 23:39:20
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文竹云中生

新虫 (初入文坛)
★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
软件设计要求很高，挑几对评分高的扩扩试试，有杂带就切胶

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7楼2021-10-02 14:10:01
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1001001

新虫 (初入文坛)
★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
换高保真酶和pcr仪器试试 这两个因素也很重要

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8楼2021-12-01 00:20:55
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未闻花开

新虫 (小有名气)
★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
你目的基因多长？如果是长片段的最好用长距离PCR专用的酶和缓冲液

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9楼2022-02-15 22:39:28
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夏小韵

新虫 (正式写手)
★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
我都是直接在基因两端取18～25bp长度设计引物，我的基因都扩出来了

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加油啊啊啊啊啊啊啊
10楼2022-05-01 22:24:54
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