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fire,

新虫 (初入文坛)

[交流] 求大佬,需要设计引物对目的基因全长扩增 已有7人参与

各位大佬,我已提取了质粒,我需要重新构建表达载体进行原核表达,打算购买试剂盒。但是,现在需要以质粒为模板进行PCR扩增,我需要设计引物,但是我用 primer 5 设计的正反引物(都从头开始扩增)所显示的结果都不好,没法用,有没有其他办法能够扩增出我的基因全长。急需大佬指导
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fire,

新虫 (初入文坛)

快来大佬哇
2楼2021-04-06 17:02:11
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菲轩

新虫 (职业作家)

3楼2021-04-06 23:36:11
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南宫逸轩

新虫 (小有名气)


小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
可以考虑一下切成片段,扩增后再连起来,目的基因太长有时候很容易出问题

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4楼2021-04-08 15:45:04
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匿名

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5楼2021-08-19 23:39:05
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匿名


小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
本帖仅楼主可见
6楼2021-08-19 23:39:20
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文竹云中生

新虫 (初入文坛)


小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
软件设计要求很高,挑几对评分高的扩扩试试,有杂带就切胶

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7楼2021-10-02 14:10:01
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1001001

新虫 (初入文坛)


小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
换高保真酶和pcr仪器试试 这两个因素也很重要

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8楼2021-12-01 00:20:55
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未闻花开

新虫 (小有名气)


小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
你目的基因多长?如果是长片段的最好用长距离PCR专用的酶和缓冲液

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9楼2022-02-15 22:39:28
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夏小韵

新虫 (正式写手)


小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
我都是直接在基因两端取18~25bp长度设计引物,我的基因都扩出来了

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加油啊啊啊啊啊啊啊
10楼2022-05-01 22:24:54
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