IPTG诱导表达不出目标蛋白
各位战友,最近在做蛋白表达,用两个兼容的载体表达12个基因,用0.5mMIPTG 37度诱导完后24小时,取全菌和破碎上清以及沉淀并处理后跑SDS-PAGE,好像都找不到目标蛋白条带。。。不知道是什么原因,是载体低拷贝还是其他的?我的是petduet-1和pACYDUET-1共表达,目标产物的量应该已经明显上升了。
望各位大神相助。
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各位战友,最近在做蛋白表达,用两个兼容的载体表达12个基因,用0.5mMIPTG 37度诱导完后24小时,取全菌和破碎上清以及沉淀并处理后跑SDS-PAGE,好像都找不到目标蛋白条带。。。不知道是什么原因,是载体低拷贝还是其他的?我的是petduet-1和pACYDUET-1共表达,目标产物的量应该已经明显上升了。
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楼主,12个基因是写错了吧?应该只能表达最多4个。
除了PAGE电泳,还用了什么鉴定方式,
求助,最近遇到蛋白不表达的问题