sgRNA设计请教
CRISPR新手。
已知 sgTelomere-GTTAGGGTTAGGGTTAGGGTTA。 怎么设计完整的 sgRNA的完整序列?有没有相关文献?我只查到这个靶向序列,但PAM等是怎样的呢?有没有直接的文献? 返回小木虫查看更多
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CRISPR新手。
已知 sgTelomere-GTTAGGGTTAGGGTTAGGGTTA。 怎么设计完整的 sgRNA的完整序列?有没有相关文献?我只查到这个靶向序列,但PAM等是怎样的呢?有没有直接的文献? 返回小木虫查看更多
PAM位点,就是NGG序列,N代表任何一种核苷酸,合成的gRNA不能包括NGG
引物设计方法取决于你用的载体质粒
最常用的是张峰的plenti-crispr体系,克隆这个sgRNA质粒对应的载体设计请看以下链接的说明书:
https://media.addgene.org/data/p ... nt_B3xTwla0bkYD.pdf
试剂盒与质粒合成合成出来的序列完全一致吗? 试剂盒合成的序列也具有 S. pyogenes terminator序列吗
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试剂盒与质粒合成合成出来的序列完全一致吗? 试剂盒合成的序列也具有 S. pyogenes terminator序列吗?