枯草芽孢杆菌转化相关疑问
有没有做枯草芽孢杆菌表达的老师,有几个问题想请教各位老师
1)请问枯草芽孢杆菌转化后过夜培养一般多久会长出阳性菌落?我试了加海藻糖电转和张晓舟老师的化学转化法,一般都要在16h之后才会长出一点点,而且菌落是很小的圆点,做菌落PCR鉴定也没有条带,只有一次过夜培养12h不到就长出大一点的圆点,白色的,但是菌落PCR还是没有条带。请问大家做枯草转化一般多久有结果,菌落形态是什么样子的,如果方便的话有图片更好
2)请问枯草芽孢杆菌可以菌落PCR鉴定吗?我是用白色枪头挑取小菌落到10ul水里,95℃加热10分钟,再-20℃放置5分钟,高速离心取1ul做模板。之前成功过一次,但是最近做了好几次都没有条带,请问是不是PCR方法不对导致结果不稳定。请问大家都是怎么鉴定的,接种液体提质粒吗?
3)请问枯草芽孢杆菌转化最后涂板取多少量,电转我是1ml复苏体系取100ul涂板,涂完是干净的,但是过夜培养后在平板表面像是长出一层像膜一样粗糙沙沙的东西,这种情况正常吗 返回小木虫查看更多
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莶葑痵o easy,我们天天做,都长满板子的。
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