应《网络安全法》要求，自2017年10月1日起，未进行实名认证将不得使用互联网跟帖服务。为保障您的帐号能够正常使用，请尽快对帐号进行手机号验证，感谢您的理解与支持！

24小时热门版块排行榜    

小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 微生物 » 发酵/表达 » 枯草芽孢杆菌转化相关疑问
221/1返回列表
查看: 5825  |  回复: 21
只看楼主 @他人 存档 新回复提醒 (忽略) 收藏    在APP中查看
【有奖交流】积极回复本帖子，参与交流，就有机会分得作者 xjqxzlxr 的 3 个金币 ，回帖就立即获得 1 个金币，每人有 1 次机会

xjqxzlxr

铁虫 (初入文坛)

[交流] 枯草芽孢杆菌转化相关疑问

有没有做枯草芽孢杆菌表达的老师，有几个问题想请教各位老师

1）请问枯草芽孢杆菌转化后过夜培养一般多久会长出阳性菌落？我试了加海藻糖电转和张晓舟老师的化学转化法，一般都要在16h之后才会长出一点点，而且菌落是很小的圆点，做菌落PCR鉴定也没有条带，只有一次过夜培养12h不到就长出大一点的圆点，白色的，但是菌落PCR还是没有条带。请问大家做枯草转化一般多久有结果，菌落形态是什么样子的，如果方便的话有图片更好

2）请问枯草芽孢杆菌可以菌落PCR鉴定吗？我是用白色枪头挑取小菌落到10ul水里，95℃加热10分钟，再-20℃放置5分钟，高速离心取1ul做模板。之前成功过一次，但是最近做了好几次都没有条带，请问是不是PCR方法不对导致结果不稳定。请问大家都是怎么鉴定的，接种液体提质粒吗？

3）请问枯草芽孢杆菌转化最后涂板取多少量，电转我是1ml复苏体系取100ul涂板，涂完是干净的，但是过夜培养后在平板表面像是长出一层像膜一样粗糙沙沙的东西，这种情况正常吗
回复此楼

» 猜你喜欢

» 抢金币啦！回帖就可以得到:

查看全部散金贴
1楼 2020-07-16 19:30:32
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
回帖支持 ( 显示支持度最高的前 50 名 )

酷草芽鲍

新虫 (正式写手)
★
xjqxzlxr(金币+1): 谢谢参与
化转方法挺方便的，江南大学博士论文或其他论文上有(需要加EGTA的方法)，一定要注意抗生素浓度问题，不确定可以做一个梯度，质粒多加点，pcr用菌液比较好，菌落pcr容易假阳性，并且如果菌体多回堵琼脂糖的泳道，导致条带聚集在孔里，跑不下去

发自小木虫Android客户端
赞一下(2人) 回复此楼
12楼2020-07-28 07:18:48
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

按时拉屎

新虫 (小有名气)
★
xjqxzlxr(金币+1): 谢谢参与
朋友成功了吗  可以一起探讨一下嘛

发自小木虫Android客户端
赞一下(2人) 回复此楼
15楼2020-12-29 18:03:53
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

匿名


★
xjqxzlxr(金币+1): 谢谢参与
本帖仅楼主可见
赞一下
16楼2020-12-30 00:05:40
已阅   申请MicEPI   回复此楼   编辑   查看我的主页

成liang

铁虫 (初入文坛)
★
xjqxzlxr(金币+1): 谢谢参与
请问楼主，现在采用什么方法做枯草芽孢杆菌的转化呢？我现在也在做，但是转化不成功
赞一下(1人) 回复此楼
20楼2023-05-04 09:25:24
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

forhighbio

捐助贵宾 (著名写手)
★
xjqxzlxr(金币+1): 谢谢参与
枯草转化so easy，我们天天做，都长满板子的。

发自小木虫Android客户端
赞一下 回复此楼
5楼2020-07-16 22:03:57
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

xjqxzlxr

铁虫 (初入文坛)
引用回帖:
5楼: Originally posted by forhighbio at 2020-07-16 22:03:57
枯草转化so easy，我们天天做，都长满板子的。

您好，请问可以讲一下细节吗
赞一下 回复此楼
9楼2020-07-17 10:19:22
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

forhighbio

捐助贵宾 (著名写手)
小冀-: 屏蔽内容, 违规存档, 涉嫌广告，可以提供建议或指导 2020-07-23 09:28:41
本帖内容被屏蔽
10楼2020-07-17 10:52:37
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

zhangzhibao

木虫 (正式写手)
★
xjqxzlxr(金币+1): 谢谢参与
什么方法可以杀死枯草芽孢杆菌，除了湿热灭菌有别的方法吗？84消毒液可以吗

发自小木虫Android客户端
赞一下 回复此楼
13楼2020-08-25 09:32:24
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

wangyuan0929

金虫 (小有名气)
★
xjqxzlxr(金币+1): 谢谢参与
之前我记得看分子克隆手册的时候，书里不建议对革兰氏阳性菌做菌落PCR来着

最后涂布的问题，要不你试一下做个梯度涂布，看看这个现象和涂布量是否有关
赞一下 回复此楼
14楼2020-08-25 11:30:59
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

按时拉屎

新虫 (小有名气)
引用回帖:
16楼: Originally posted by jpk9999 at 2020-12-30 00:05:40
枯草芽孢杆菌很好做的啊

请问用什么方法呀  化学转化两步法吗 我做电转还没有成功过
赞一下 回复此楼
17楼2021-01-11 10:05:27
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

按时拉屎

新虫 (小有名气)
引用回帖:
9楼: Originally posted by xjqxzlxr at 2020-07-17 10:19:22
您好，请问可以讲一下细节吗...

一起交流下嘛 我也是做枯草的

发自小木虫Android客户端
赞一下 回复此楼
18楼2021-04-01 07:20:19
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

起风了521

新虫 (小有名气)
★
xjqxzlxr(金币+1): 谢谢参与
引用回帖:
12楼: Originally posted by 酷草芽鲍 at 2020-07-28 07:18:48
化转方法挺方便的，江南大学博士论文或其他论文上有(需要加EGTA的方法)，一定要注意抗生素浓度问题，不确定可以做一个梯度，质粒多加点，pcr用菌液比较好，菌落pcr容易假阳性，并且如果菌体多回堵琼脂糖的泳道，导致 ...

菌落pcr为什么会有假阳性呀
赞一下 回复此楼
19楼2022-11-18 14:39:40
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

高nb

新虫 (初入文坛)
★
xjqxzlxr(金币+1): 谢谢参与
请问电转做出来了吗？我也是假阳性
赞一下 回复此楼
21楼2023-08-12 19:29:52
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

陈YY@

新虫 (初入文坛)
★
xjqxzlxr(金币+1): 谢谢参与
引用回帖:
18楼: Originally posted by 按时拉屎 at 2021-04-01 07:20:19
一起交流下嘛 我也是做枯草的
...

请问还在做吗

发自小木虫IOS客户端
回复此楼
22楼2024-07-12 16:17:55
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
简单回复
xiaoqiuqiu202楼
2020-07-16 19:48   回复  
xjqxzlxr(金币+1): 谢谢参与
斓曦20193楼
2020-07-16 20:07   回复  
xjqxzlxr(金币+1): 谢谢参与
。 发自小木虫Android客户端
tzynew4楼
2020-07-16 21:38   回复  
xjqxzlxr(金币+1): 谢谢参与
9 发自小木虫Android客户端
syhorchid6楼
2020-07-16 23:20   回复  
xjqxzlxr(金币+1): 谢谢参与
zhuzijack7楼
2020-07-17 07:40   回复  
xjqxzlxr(金币+1): 谢谢参与
u 发自小木虫Android客户端
6804168楼
2020-07-17 07:48   回复  
xjqxzlxr(金币+1): 谢谢参与
6 发自小木虫IOS客户端
miaojiabing11楼
2020-07-23 08:32   回复  
xjqxzlxr(金币+1): 谢谢参与
相关版块跳转 我要订阅楼主 xjqxzlxr 的主题更新
221/1返回列表
提示: 如果您在30分钟内回复过其他散金贴，则可能无法领取此贴金币
普通表情 龙 兔 虎 猫 高级回复 (可上传附件)
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[硕博家园] 售SCI-T0P文章，我:8O.5.5.1.O.54,科目齐全,可+急 +3 Vi50GxzrFcSG 2026-08-07 6/300 2026-08-08 10:19 by 3OOjAIS77qg2
[基金申请] fileCode有新解读？ +8 Tide man 2026-08-08 16/800 2026-08-08 09:59 by Tide man
[考博] 售SCI一区文章，我:8.O.55.1.O.54,科目齐全,可伽急 +3 HEQlVqMTIA7d 2026-08-07 3/150 2026-08-08 03:47 by 6vVgjDL4CnGu
[基金申请] 基金中了 +14 laoda193707 2026-08-06 14/700 2026-08-08 00:23 by 实验小白ha
[基金申请] 关于filecode +4 布布和一二 2026-08-07 7/350 2026-08-07 22:55 by zhanghaozhu
[基金申请] 娱乐 +6 Tide man 2026-08-03 6/300 2026-08-07 22:40 by 铁帽子农民
[基金申请] 化学口download_prp&fileCode的固定段好像这几天一直没变，有变的大神么？ +3 Tide man 2026-08-07 4/200 2026-08-07 22:39 by Tide man
[基金申请] 关于代码变化问题，想知道的进来 +9 且听虎啸 2026-08-07 12/600 2026-08-07 21:53 by 理想三旬2025
[基金申请] 固定端突然变了，今天 +6 archvillain 2026-08-06 10/500 2026-08-07 16:03 by 医学老男孩
[基金申请] filecode与中标关系的预测 +3 布布和一二 2026-08-07 3/150 2026-08-07 15:09 by gltch
[基金申请] filecode变化情况 +6 布布和一二 2026-08-07 22/1100 2026-08-07 14:45 by 且听虎啸
[论文投稿] 十年后又回来了，论文投稿求助 +4 哈哈114477 2026-08-01 4/200 2026-08-07 14:39 by jgy194592
[基金申请] filecode +14 等待解的谜 2026-08-06 19/950 2026-08-07 12:20 by wlwhappy
[基金申请] filecode +8 布布和一二 2026-08-06 11/550 2026-08-06 20:41 by tangpu318
[基金申请] 求各位大神看下 100+6 hpkpkpkp 2026-08-05 33/1650 2026-08-06 14:49 by zhiyanjiang
[基金申请] 影响面上的因素 +8 布布和一二 2026-08-05 11/550 2026-08-06 10:41 by 宝贝虫子
[基金申请] 8月时间戳变的，举个手。玩一下，释放压力 +9 archvillain 2026-08-04 11/550 2026-08-05 20:06 by wlwhappy
[考博] 【2027博士申请】纳米药物递送方向 20+3 13586093586 2026-08-03 4/200 2026-08-05 09:59 by lfy8008
[基金申请] 纯娱乐，不喜欢勿喷 +7 Tide man 2026-08-04 10/500 2026-08-04 15:10 by loufangrui
[基金申请] 面上提前没消息，有中的吗 +14 archvillain 2026-08-02 18/900 2026-08-04 14:42 by archvillain
信息提示
关闭
请填处理意见
关闭