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乳酸菌L.casei的培养

作者 xiangxuanji
来源: 小木虫 600 12 举报帖子
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用国外寄过来的固体培养的L.casei进行活化扩大培养,使用的培养基是MRS,文献上说要在培养基中加入5μg/ml的红霉素,于是使用液体MRS过夜培养,不摇动,37℃,再转入固体培养基时发现根本长不起来,试过很多次,液体的培养基不管加或不加抗生素都可以长出来,不过不加抗生素的长的较好,在固体培养集中不管加或不加抗生素都不能长,请问各位虫友问题出现在哪里呢? 返回小木虫查看更多

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  • 精华评论
  • fakeandff

    我不清楚你是怎样转移到固体培养基上的,是划线在表面还是混合培养的,乳酸菌一般是厌氧菌,如果转移到固体上应该是混合培养,长在底部或者悬浮在中层,也可以做夹层培养,目的就是制造一个厌氧的环境。

  • zhangxingc

    如果只是一株单菌,应该很好培养的
    不论用MRS-broth还是MRS-agar,都能很好生长的
    你加红霉素的目的不明确啊,一般加抗生素是抑制其它菌的生长,你的是单菌,没必要加的
    针对你的问题,你试试在MRS-broth里多传几代,然后在MRS-agar里培养

  • xiangxuanji

    引用回帖:
    2楼: Originally posted by fakeandff at 2013-03-06 09:25:20
    我不清楚你是怎样转移到固体培养基上的,是划线在表面还是混合培养的,乳酸菌一般是厌氧菌,如果转移到固体上应该是混合培养,长在底部或者悬浮在中层,也可以做夹层培养,目的就是制造一个厌氧的环境。

    用固体培养基时,我划线和混合培养都试过,而且将培养皿用封口膜包紧了也还是没有菌落啊,不知道问题在哪边

  • xiangxuanji

    引用回帖:
    3楼: Originally posted by zhangxingc at 2013-03-06 09:30:14
    如果只是一株单菌,应该很好培养的
    不论用MRS-broth还是MRS-agar,都能很好生长的
    你加红霉素的目的不明确啊,一般加抗生素是抑制其它菌的生长,你的是单菌,没必要加的
    针对你的问题,你试试在MRS-broth里多 ...

    我是看到文献上面在培养基中加红霉素的,不知道是不是L.casei菌株中本身含有红霉素抗性基因,因为没有查到,所以就照做了。
    我之前有看到你的回复说先用脱脂牛奶培养活化一下,不知道这边是否适用?
    新手入门,嘿嘿

  • zhangxingc

    引用回帖:
    5楼: Originally posted by xiangxuanji at 2013-03-06 14:35:33
    我是看到文献上面在培养基中加红霉素的,不知道是不是L.casei菌株中本身含有红霉素抗性基因,因为没有查到,所以就照做了。
    我之前有看到你的回复说先用脱脂牛奶培养活化一下,不知道这边是否适用?
    新手入门,嘿 ...

    不用加这个抗生素的,因为加了对干酪乳杆菌的生长一点作用都没有

    如果你是用于活化,用我说的那个方法当然可以的

  • xiangxuanji

    引用回帖:
    6楼: Originally posted by zhangxingc at 2013-03-06 15:28:16
    不用加这个抗生素的,因为加了对干酪乳杆菌的生长一点作用都没有

    如果你是用于活化,用我说的那个方法当然可以的...

    再请问,活化配方是脱脂乳培养基:10%脱脂牛奶+1%酵母粉 ,对不?灭菌条件是什么?
    活化之后是直接用接种环接种到液体MRS吗?
    另外我的菌种在固体培养基上已经有一个月了,打开盖子是很酸的臭味,不知道是不是坏了。
    非常感谢!

  • zhangxingc

    引用回帖:
    7楼: Originally posted by xiangxuanji at 2013-03-06 16:00:32
    再请问,活化配方是脱脂乳培养基:10%脱脂牛奶+1%酵母粉 ,对不?灭菌条件是什么?
    活化之后是直接用接种环接种到液体MRS吗?
    另外我的菌种在固体培养基上已经有一个月了,打开盖子是很酸的臭味,不知道是不是坏 ...

    对,就是那个配方
    灭菌不就是高压锅灭菌吗?121度7min就可以了
    正常情况下在冰箱里放一个月应该是没有问题的,发酵发臭的话可能说明这个菌不对了
    你没有这个菌的原始菌粉吗,有的话再活化一遍啊

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