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【讨论】清洗受污染的色谱柱,为何要用异丙醇?

作者 痴夷子皮
来源: 小木虫 1850 37 举报帖子
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前些时候,回帖建议虫友用异丙醇冲洗反相色谱柱。斑竹问我,为何要用异丙醇。

咳咳,平时不求甚解,所以一下子也答不上原因。

后来查了些资料,分享一下:

首先,异丙醇特殊的溶解性,异丙醇能和乙酸、丙酮、乙腈、苯、丁醇、四氯化碳、氯仿、环己烷、二氯甲烷、DMF、DMSO、乙酸乙酯、乙醇、二乙醚、正己烷、甲醇、THF、甲苯、水、二甲苯等液相可能用到的几乎所有的溶剂混溶。混溶比例,不深究。

其次,使用流动相时,若溶剂的混溶性不好甚至不混溶,会形成乳化的小液滴,毁坏色谱柱。

由此可得知,异丙醇具有某些特点:“去污能力”强;不伤色谱柱。以它作为过渡溶剂和清洗受污染的色谱柱及液相配件,情理之中了。
注:异丙醇粘度大,会使压力上升。



另附被污染的正相、反相色谱柱的清洗方法。
反相色谱柱(C18、C8):
水/乙腈95/5
→100%乙腈
→乙腈/异丙醇75/25
→100%异丙醇
→100%二氯甲烷
→100%己烷
若需用到二氯甲烷、己烷,使用反相流动相前需用异丙醇过渡
根据污染物性质,选择合适的冲洗溶剂及程序


正相色谱柱(SiO2、Diol):
甲醇/三氯甲烷50/50→100%乙酸乙酯



还请各位多多交流,指点。 返回小木虫查看更多

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  • 精华评论
  • tian0429

    引用回帖:
    Originally posted by 痴夷子皮 at 2011-04-01 08:08:27:
    反方向,一般情况下都不用的。反冲对色谱柱柱效影响不好。

    对于一些强保留组分,若异丙醇不能清洗干净,可以尝试使用二氯甲烷。异丙醇极性4.3,二氯甲烷3.4。

    反向冲洗是指将流动相从正己烷冲回二氯甲烷、异丙醇等等再回到水

  • 痴夷子皮

    引用回帖:
    Originally posted by tian0429 at 2011-04-01 09:52:27:
    反向冲洗是指将流动相从正己烷冲回二氯甲烷、异丙醇等等再回到水

    哦,明白你的意思了,但这样也得先用异丙醇过渡,反冲后,再用异丙醇过渡至水相。

  • 谢正红

    很好,谢谢楼主!

  • lyh197

    学习了,呵呵

  • News

    受教!!!!

  • guoyayun40

    引用回帖:
    Originally posted by 痴夷子皮 at 2011-04-01 08:08:27:
    反方向,一般情况下都不用的。反冲对色谱柱柱效影响不好。

    对于一些强保留组分,若异丙醇不能清洗干净,可以尝试使用二氯甲烷。异丙醇极性4.3,二氯甲烷3.4。

    大侠:
        你好,我想问一下,我用异丙醇0.3ml冲了四五个小时吧,虽然柱压下降,但是还是高,如果用二氯甲烷冲会不会吧C18键冲断呀?
        谢谢

  • 痴夷子皮

    引用回帖:
    Originally posted by guoyayun40 at 2011-04-02 14:41:59:
    大侠:
        你好,我想问一下,我用异丙醇0.3ml冲了四五个小时吧,虽然柱压下降,但是还是高,如果用二氯甲烷冲会不会吧C18键冲断呀?
        谢谢

    不会的,不过用二氯甲烷冲过后,记得先换异丙醇过渡,再换上反相流动相。

  • guoyayun40

    引用回帖:
    Originally posted by 痴夷子皮 at 2011-04-02 23:17:36:
    不会的,不过用二氯甲烷冲过后,记得先换异丙醇过渡,再换上反相流动相。

    谢谢大侠

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