【讨论】清洗受污染的色谱柱,为何要用异丙醇?
前些时候,回帖建议虫友用异丙醇冲洗反相色谱柱。斑竹问我,为何要用异丙醇。
咳咳,平时不求甚解,所以一下子也答不上原因。
后来查了些资料,分享一下:
首先,异丙醇特殊的溶解性,异丙醇能和乙酸、丙酮、乙腈、苯、丁醇、四氯化碳、氯仿、环己烷、二氯甲烷、DMF、DMSO、乙酸乙酯、乙醇、二乙醚、正己烷、甲醇、THF、甲苯、水、二甲苯等液相可能用到的几乎所有的溶剂混溶。混溶比例,不深究。
其次,使用流动相时,若溶剂的混溶性不好甚至不混溶,会形成乳化的小液滴,毁坏色谱柱。
由此可得知,异丙醇具有某些特点:“去污能力”强;不伤色谱柱。以它作为过渡溶剂和清洗受污染的色谱柱及液相配件,情理之中了。
注:异丙醇粘度大,会使压力上升。
另附被污染的正相、反相色谱柱的清洗方法。
反相色谱柱(C18、C8):
水/乙腈95/5
→100%乙腈
→乙腈/异丙醇75/25
→100%异丙醇
→100%二氯甲烷
→100%己烷
(若需用到二氯甲烷、己烷,使用反相流动相前需用异丙醇过渡)
(根据污染物性质,选择合适的冲洗溶剂及程序)
正相色谱柱(SiO2、Diol):
甲醇/三氯甲烷50/50→100%乙酸乙酯
还请各位多多交流,指点。
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京公网安备 11010802022153号
不要需按反方向在冲洗回来吗?
二氯甲烷何解
反方向,一般情况下都不用的。反冲对色谱柱柱效影响不好。
对于一些强保留组分,若异丙醇不能清洗干净,可以尝试使用二氯甲烷。异丙醇极性4.3,二氯甲烷3.4
,
要反向冲洗的
反冲对柱效不好。
学习了,总结的挺好的