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Originally posted by changling at 2010-10-28 15:29:01:
急~~~~~~
本人在设计一个多糖提取实验，有些问题想请教大家！
请问各位，研究植物多糖提取时一定要进行多糖脱色吗？如果一定要做，一般都采用哪些方法？对提取率影响最低的方法是什么？

脱色不一定，但是一定需要脱脂
95etoh 或者石油醚
醇沉的时候要小心添加，不然容易结大块，絮凝杂质

不一定要脱色，有文献报道脱色会影响多糖的活性，本人没做过，不知是不是如此。脱色的方法有很多，一般采用双氧水氧化脱色，也有采用活性炭吸附的，你可以试一试，看哪种效果好且得率高！
有时候不脱色的多糖很难进行离子交换柱层析，具体原因我也不很清楚，希望可以一起探讨。

引用回帖:

Originally posted by zhh8672 at 2010-10-28 20:20:30:
不一定要脱色，有文献报道脱色会影响多糖的活性，本人没做过，不知是不是如此。脱色的方法有很多，一般采用双氧水氧化脱色，也有采用活性炭吸附的，你可以试一试，看哪种效果好且得率高！
有时候不脱色的多糖很难 ...

多糖提取工艺：
原料冷冻，粉碎
（1:1的石油醚或者1:3的95%etoh回流脱脂、脱色，1.5h，沥干）*2
（7倍量的水，沸腾提取，离心分离）*3

滤液浓缩到适当（浓缩不够的话醇沉浪费etoh，太浓的话，醇沉出来的比较大）
（搅拌，缓慢加入95%etoh，静置》12h，过滤，沉淀水溶）*3
理论80%的醇沉效果最适宜
得到的粗多糖溶解，配制缓冲溶液
加入糖化酶缓冲溶液，
升温，恒温酶解
升温灭酶
减压干燥、
多糖粉碎

ps：
1、提取的多糖太大，身体吸收不了，也只能做概念，没的提高免疫的功能是没用的
2、活性炭是除不去色素的，但是你也过滤不了糖液中细微的活性炭，即使用0.45的膜，干燥出来的糖中就有很明显的黑炭

[ Last edited by yu27317961 on 2010-10-28 at 20:50 ]
，

引用回帖:

Originally posted by yu27317961 at 2010-10-28 20:43:17:


多糖提取工艺：
原料冷冻，粉碎
（1:1的石油醚或者1:3的95%etoh回流脱脂、脱色，1.5h，沥干）*2
（7倍量的水，沸腾提取，离心分离）*3

滤液浓缩到适当（浓缩不够的话醇沉浪费etoh，太浓的话，醇沉出来的 ...

请问糖化酶酶解的目的是什么呢？你是否做过DEAE柱层析分离，本人正在为此困扰，用DEAE52分离有颜色的多糖，无论用多大浓度的盐溶液都不能洗脱出来

引用回帖:

Originally posted by zhh8672 at 2010-10-29 09:16:26:

请问糖化酶酶解的目的是什么呢？你是否做过DEAE柱层析分离，本人正在为此困扰，用DEAE52分离有颜色的多糖，无论用多大浓度的盐溶液都不能洗脱出来

提取的多糖太大，身体吸收不了，也只能做概念，没的提高免疫的功能是没用的

在脱脂，醇沉中就可以除去的啊

如果颜色很深的话，最好脱色一下，要不对最后的产品的色泽有影响。

活性炭脱色