双酶切的反应体系和时间
各位虫友有做过XbaI和XhoI双酶切的么?
我用这两个酶切 反应体系 XbaI 1ul，
XhoI 1ul，
10 M 2ul，
质粒 5ul，
ddH2O 11ul
37度 6小时，但是酶切后效果不好，请问大家的反应体系和反应条件是怎么样的呀？
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我最近也在做双酶切，用的takara的，试过很多体系，结果不是很理想
再不行，我就换fermentas的酶，听说很好
TAKARA的酶虽然说 3~5u可以 切1ugDNA，但是我认为10U才能切1ug的。
你按照 10u切 1ug 试试，而且每种酶切它的 单位体积的u单位也不一样。
ps:3h之后酶几乎没什么活力了，