我现在将DNA片段连接到了载体上,现在想通过双酶切从载体上将正确的目的片段切下来做RFLP分析,酶是BamH1和Xho1。但是我不知道目的片段中有没有这两种酶的作用位点,该怎么办?双酶切是同时反应好还是分别单酶切好? 返回小木虫查看更多
你可以用webcutter。将你的目的片段输入后就可以分析。有什么酶切位点,没有什么酶切位点都会告诉你的!http://rna.lundberg.gu.se/cutter2/这是网址!
学习一下。
楼主,你有目的片段的序列吧?有的话根本不需要什么分析软件,直接在序列里搜索下酶切位点就好了。。。如果你没有目的序列,那长度总该知道吧,可以用那两种酶适切下,看下结果就知道了。。。那两个酶还是可以一起切的,我经常做这个。。
如果你有目的片段的序列,你可以用NTI看看,基因里面有没有这俩个酶切位点.另外,要看你的这两个美是不是一个公司的,在同一个BUFFER中的活性怎么样,温度一样不.我一般都是在一起切,效果还不错.你可以试一试.
最土的方法,把序列放在word上,再ctrl+F,比如要找XhoI搜下CTCGAG,就可以了 当然用软件是最好的了
在设计引物时加上酶切位点,不麻烦!!
你可以用webcutter。将你的目的片段输入后就可以分析。有什么酶切位点,没有什么酶切位点都会告诉你的!http://rna.lundberg.gu.se/cutter2/这是网址!
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楼主,你有目的片段的序列吧?有的话根本不需要什么分析软件,直接在序列里搜索下酶切位点就好了。。。如果你没有目的序列,那长度总该知道吧,可以用那两种酶适切下,看下结果就知道了。。。那两个酶还是可以一起切的,我经常做这个。。
不麻烦啊,直接在5‘端加酶切位点和2-3个保护碱基就可以,非常常用的方法
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如果你有目的片段的序列,你可以用NTI看看,基因里面有没有这俩个酶切位点.另外,要看你的这两个美是不是一个公司的,在同一个BUFFER中的活性怎么样,温度一样不.我一般都是在一起切,效果还不错.你可以试一试.
最土的方法,把序列放在word上,再ctrl+F,比如要找XhoI搜下CTCGAG,就可以了
当然用软件是最好的了
在设计引物时加上酶切位点,不麻烦!!