当前位置: 首页 > 生物科学 >双酶切获得目的片段

双酶切获得目的片段

作者 greatsaint
来源: 小木虫 750 15 举报帖子
+关注

我现在将DNA片段连接到了载体上,现在想通过双酶切从载体上将正确的目的片段切下来做RFLP分析,酶是BamH1和Xho1。但是我不知道目的片段中有没有这两种酶的作用位点,该怎么办?双酶切是同时反应好还是分别单酶切好? 返回小木虫查看更多

今日热帖
  • 精华评论
  • Anson1358

    你可以用webcutter。将你的目的片段输入后就可以分析。有什么酶切位点,没有什么酶切位点都会告诉你的!http://rna.lundberg.gu.se/cutter2/这是网址!

  • xuezhen

    学习一下。

  • spiderboy

    楼主,你有目的片段的序列吧?有的话根本不需要什么分析软件,直接在序列里搜索下酶切位点就好了。。。如果你没有目的序列,那长度总该知道吧,可以用那两种酶适切下,看下结果就知道了。。。那两个酶还是可以一起切的,我经常做这个。。

  • smallcat227

    引用回帖:
    Originally posted by greatsaint at 2009-8-7 08:26:



    我用的是克隆试剂盒,两侧的MCS都是知道的,有我上面说的那两个酶切位点。只是我现在怕目的片段中也有这两个酶的作用位点,若是这样再用此双酶切的话就得不到目的片段了。你说的有道理,可以在设计引物时加 ...

    不麻烦啊,直接在5‘端加酶切位点和2-3个保护碱基就可以,非常常用的方法

  • wulei0708

    如果你有目的片段的序列,你可以用NTI看看,基因里面有没有这俩个酶切位点.另外,要看你的这两个美是不是一个公司的,在同一个BUFFER中的活性怎么样,温度一样不.我一般都是在一起切,效果还不错.你可以试一试.

  • 银杏下

    最土的方法,把序列放在word上,再ctrl+F,比如要找XhoI搜下CTCGAG,就可以了
    当然用软件是最好的了

  • greatsun

    在设计引物时加上酶切位点,不麻烦!!

猜你喜欢
应助之星
下载小木虫APP
与700万科研达人随时交流
  • 二维码
  • IOS
  • 安卓