求助：请问用Triton-100破细胞需要多长时间

请问哪位做过用Triton-100破细胞膜，需要多长时间？

一般10分钟
但有的protocal将破膜与封闭合在一起 45min

谢谢，我知道了。 以后多多指导。

请问如果是帖壁生长的细胞，在破细胞膜之前用把细胞先悬浮起来吗？我看有的文献写刮下来，有的没写。

再次求助

请问如果是帖壁生长的细胞，在用Triton-100破细胞膜之前用把细胞先悬浮起来吗？我看有的文献写刮下来，有的没写。

贴壁生长的细胞一般不需悬浮
我们做的核内蛋白免疫细胞化学 一般 多聚甲醛固定细胞后  Triton-100破膜10分钟，然后封闭
最近买了R&D的一个抗体 它给的protocal 是固定后 0.1%Triton-100,10%的血清透膜加封闭45min
做出来效果也不错
贴壁细胞 如果生长紧密 需要计数的话 也可以消化下来后 固定 滴片 透膜，