| 查看: 94 | 回复: 0 | ||
[资源]
好看的胃黏膜HE切片长什么样？HE染色6个常见翻车现场及解决方案
|
 如果你做的胃黏膜he切片达到了这个标准，导师肯定就不会问你了。 那么一张好看的he切片有哪些判断标准呢？ 我们常常说，he切片要做到完整、清晰、干净，膜就是膜，核就是核，细胞的组织结构要清晰可辨，有明显的边界。切片染色要均匀，表面没有污渍，干净透亮。 说的更详细一些就是： he染色后细胞核呈现深蓝色或蓝紫色，我们在看结果时要观察核的颜色深浅、形态大小、核质比等特征。这些是判断细胞活性和肿瘤良恶性的重要指标。肿瘤细胞会细胞核增大、颜色变深，同时核质比增大。 细胞质在he染色中呈现粉红色至红色，我们需要观察细胞质的丰富程度、染色深浅来进行病理判断。不同的细胞类型细胞质染色深浅会有差异，嗜酸性颗粒染色较深。 除了细胞核和细胞质，组织中的其它成分在he染色结果中颜色和形态大小也会存在差异，详细内容可以查看以下表格。  在了解了好的he切片样子后，我们再来看看那些异常的实验结果吧！ 接下来我们就详细的讲一讲这些翻车现场。  1整体偏蓝 he切片整体偏蓝，细胞核甚至被染成黑色，背景深，看不清结构。 出现这种结果的原因可能是切片在苏木精中泡的太久或者染液太浓，当然，也可能是分化时间短或切片有点厚。 针对这种情况，我们可以缩短苏木精的染色时间1-2min，适当延长1%盐酸酒精分化的时间5-10s。建议分化在显微镜下操作，当核质染色分明后再进行下一步。伊红染液也有使用时长，建议超过两周的直接扔。新鲜的伊红染液浸泡1-2min足矣。 2整体偏红 切片整体偏红，细胞核颜色浅，细胞质也谈，核质对比度差。 原因无外乎：苏木精染色不足、分化超时、伊红染过了。面对这种结果，我们首先核查一下苏木精的使用记录，建议2-4周更换一次。苏木精的染色时间可以延长2-4min看看结果。分化的时间一定要严格控制，别超过15s。伊红染色后快速用水冲洗，防止染色过度。 3核非蓝色 细胞核可能是棕红、苍白或颜色太深。 有时候我们会将细胞核染成棕红色，究其原因是苏木精氧化失效或返蓝不够。建议我们在染色之前看看苏木精液面有没有氧化膜。氧化膜是有明显金属光泽的蓝紫色（或紫红色）薄膜，也常被称做“金属膜”或“彩虹膜”。如果有氧化膜建议使用前进行过滤。 苏木精失效或分化超时可能会造成细胞核苍白。旧液和洗液不能混合使用，换液就要整瓶换。分化不足会造成细胞核颜色过深，甚至将胞浆染成蓝色。建议重新进行一次分化，增加10s，并在显微镜下观察直至胞浆脱色。 4染色不均 切片出现花斑、边缘中心深浅不一结果。 he切片染色不均可能是由多个原因造成的，比如切片脱蜡不彻底、片子薄厚不均等操作细节。切片机使用新的刀片，确保切片厚度维持在3-5μm。每次二甲苯的脱蜡时间在15min。染色过程中可以轻微晃动切片，确保试剂均匀染色。 5切片脱落 切片脱落、污染、有气泡等问题。 淋巴结、脾、骨髓等含血较多的组织容易脱片。这些组织在制备切片时，脱水透明要做透，切片厚度确保3-5μm。 有个偏方，据说对发脆发硬的组织有用，大家不妨试一下：棉签蘸5%氨水或2%冰醋酸，擦组织表面10到15秒，丢进冰水混合物泡1分钟再切。钙化、骨组织这类硬骨头，能明显改善。 6切片雾化 he切片雾化会造成切片整体或局部呈现出半透明的“朦胧感”，组织结构和细胞细节模糊不清。肉眼可见切片表面有一层白色或灰白色薄雾，仿佛是隔着一层磨砂玻璃看东西。显微镜下，整个视野模糊不清，无法区分细胞核和细胞质。 切片雾化的主要原因是脱水不彻底。我们在实验过程中，要确保乙醇处理的顺序和时间完全正确。可以参考这样的操作流程：70%乙醇10-20s，80%乙醇10-20s，95%乙醇1-2min，无水乙醇2-3min。 脱蜡不彻底，切片会形成白色斑点。所以我们一直强调，脱蜡要彻底，严格按照流程操作。义翘神州经过多年实践，形成了一套成熟的步骤，大家可以尝试一下：两次二甲苯，每次15min，无水乙醇2min，95%酒精2min，80%酒精2min，70%酒精2min。 总结一下 控制染色时间、分化时间，使用新鲜染液，并结合显微镜观察，是避免he染色翻车的核心技巧。真正的技术，不是我们背下的实验参数，而是对变量的敏感度。 当我们能够从一张“蓝的发紫”的片子里，瞬间找到是分化时间的问题还是染液失效时，我们就真正的熟练掌握he染色技术了，再也不怕导师半夜的问询了。 |
回复此楼» 本帖附件资源列表
-
欢迎监督和反馈：小木虫仅提供交流平台，不对该内容负责。
本内容由用户自主发布，如果其内容涉及到知识产权问题，其责任在于用户本人，如对版权有异议，请联系邮箱：xiaomuchong@tal.com - 附件 1 : 好看的胃黏膜HE切片长什么样？HE染色6个常见翻车现场及解决方案.pdf
2026-05-14 14:12:15, 332.91 K
» 猜你喜欢
上海大学实验技术岗位非升即走
已经有10人回复
-
评审有感
已经有12人回复
-
云南大学材料与能源学院解琳课题组钙钛矿博士招生
已经有4人回复
-
博士申请
已经有6人回复
-
面上本子正文33页，违规吗？会被低分嘛？
已经有10人回复
-
国自然上会要求
已经有9人回复
-
今年审到国自然15份，谈谈感受
已经有16人回复
-
考博自荐
已经有6人回复
-
青C资助名额大幅增加！
已经有16人回复
-
重磅！青年科学基金项目（C类）资助增幅预计超过50%
已经有10人回复
» 本主题相关商家推荐: (我也要在这里推广)
