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请问各位大神有纯化人肌红蛋白的高手吗?想请教一下

作者 ljj52677
来源: 小木虫 450 9 举报帖子
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最近在做人肌红蛋白的纯化,菌用的是以前的保种菌,纯化过程:破菌——过DEAE柱(试过kpi(pH=7),tris(pH=8.5)常常要过两次才澄清,阳离子柱试过pH6,6.5挂不住)——过凝胶色谱柱G75, 样品纯度可以达到4.5-5.0,但是去做质谱总是会有分子量为14000左右,二聚体为28000的杂质峰,后期再过CM柱,再过一次小G75也难除去,请问大家纯化HMb比较好的流程是什么?有没有遇到同样的干扰峰?@hc-material 返回小木虫查看更多

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  • 精华评论
  • snoopyzxx

    做过脑红蛋白的表达和纯化。

  • snoopyzxx

    血红蛋白  肌红蛋白  脑红蛋白 做出来就是带色的啊

  • ljj52677

    引用回帖:
    4楼: Originally posted by snoopyzxx at 2021-02-08 20:33:49
    做过脑红蛋白的表达和纯化。

    你做的是神经红蛋白对吧?神经红蛋白你纯化完做质谱是否有28000左右的峰?不过这两种蛋白等电点不同,可能处理方法也会不同吧?谢谢您的回复

  • ljj52677

    引用回帖:
    5楼: Originally posted by snoopyzxx at 2021-02-08 20:34:30
    血红蛋白  肌红蛋白  脑红蛋白 做出来就是带色的啊

    嗯嗯,是带颜色的

  • ljj52677

    求大神们指点

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