电泳条带分析，求助！
求助，第一次做SDS-PAGE，分离胶12%（40min左右），浓缩胶5.1%（20min左右），上样量10微升，样品蛋白质（纯度80%左右）浓度4mg/400微升，电泳时80V25min，120V95min；染色1h，脱色快15h，求指点！！！
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求求大家帮我看看，样品浓度是高了还是低了，另外我用的上样缓冲液是2乘的，我用的时候是把它稀释成1乘的再溶解样品，因为我的蛋白质样品是冻干的粉末，不知道这样做对不对，
样品浓度我看不出来，记得上样量一般50到100微克吧，还有上网缓冲液那个，我觉得可以用生理盐水溶蛋白再1比1混合吧。
赋个内参看下唄
洗脱了15小时？？