96孔板培养生物膜的问题
在96孔聚苯乙烯微孔培养板中每孔加入100μl培养液,接种100μl过夜培养菌液,37°C静置孵育24h;
(2)将培养液吸出,每孔加入200μl无菌PBS缓冲液清洗板孔3次;
(3) 每孔加入100μl甲醇固定15min,然后吸出培养孔中的甲醇,自然风干;
(4) 每孔加入100μl 1%结晶紫溶液,室温下染色20min;
(5) 吸出培养孔中的结晶紫染色液后,用pbs把多余的染料冲洗干净;
(6) 把培养板倒置在滤纸上除去残余的水,并在37°C烘箱中烘干或室温凉干;
(7) 完全干燥后,每孔加入100μl 30%冰乙酸溶液,在37°C培养箱中作用30min以溶解结晶紫;
(8) 590nm条件下,用酶标仪测定培养孔中溶液的OD值;
这是我的实验步骤,但是我在清洗的时候看到很多浮游的块状物请问这是生物膜吗,我怎么样清洗才能洗的干净又不破坏生物膜
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我也遇到这种现象,请问你找到原因了吗?
给你站内发消息了
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请问你们找到原因了吗?
楼主,请问您找到原因了么?
请问。。。。知道怎么清洗更好了吗?跪求啊,最近被这个搞死了
你好,请问结晶紫染色,需要避光吗