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DNA重组测序不成功

作者 小小艾999
来源: 小木虫 150 3 举报帖子
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目的基因载体质粒PCR之后,跑电泳见10000左右条带,单酶切后,跑电泳见8000左右条带,然后自连,转DH5阿尔法细胞,挑单克隆,摇菌,送测序,公司没测出来?!     自己又把那天摇的菌提了个质粒,跑电泳,只有2000左右条带!!    实验小白,求助各位师兄姐,这是怎么回事 ?   我要的目的条带应该大约在8000左右。

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  • 精华评论
  • 无心云朵

    涂板后,你先挑单克隆菌体,做个PCR鉴定,你自己找筛选一遍哈,一般转化实验都会有假阳性,最后你才将PCR菌落鉴定阳性菌去测序,这样可靠性更大~

  • 小小艾999

    做了酶切产物的对照

  • 小小艾999

    对照组没有长  所以就直接送测序了  但是我没有验证菌液     谢谢

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