DNA重组测序不成功
目的基因载体质粒PCR之后,跑电泳见10000左右条带,单酶切后,跑电泳见8000左右条带,然后自连,转DH5阿尔法细胞,挑单克隆,摇菌,送测序,公司没测出来?! 自己又把那天摇的菌提了个质粒,跑电泳,只有2000左右条带!! 实验小白,求助各位师兄姐,这是怎么回事 ? 我要的目的条带应该大约在8000左右。
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目的基因载体质粒PCR之后,跑电泳见10000左右条带,单酶切后,跑电泳见8000左右条带,然后自连,转DH5阿尔法细胞,挑单克隆,摇菌,送测序,公司没测出来?! 自己又把那天摇的菌提了个质粒,跑电泳,只有2000左右条带!! 实验小白,求助各位师兄姐,这是怎么回事 ? 我要的目的条带应该大约在8000左右。
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涂板后,你先挑单克隆菌体,做个PCR鉴定,你自己找筛选一遍哈,一般转化实验都会有假阳性,最后你才将PCR菌落鉴定阳性菌去测序,这样可靠性更大~
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做了酶切产物的对照
对照组没有长 所以就直接送测序了 但是我没有验证菌液 谢谢