做斜面培养基不凝固,不懂为啥
今天分别用了伊红美蓝琼脂和营养琼脂两种培养基做斜面,然而灭菌后做斜面都不凝固,这是为啥?
我的步骤:如营养琼脂,按配比称3.3g加100ml水,加热搅拌溶解,分装到试管中后拍棉花塞,包扎后于121℃灭菌锅中灭菌20分钟,好了之后制作斜面,等了有半小时久,培养基都不凝固这是为何?
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今天分别用了伊红美蓝琼脂和营养琼脂两种培养基做斜面,然而灭菌后做斜面都不凝固,这是为啥?
我的步骤:如营养琼脂,按配比称3.3g加100ml水,加热搅拌溶解,分装到试管中后拍棉花塞,包扎后于121℃灭菌锅中灭菌20分钟,好了之后制作斜面,等了有半小时久,培养基都不凝固这是为何?
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补充上面说的:琼脂的在水中需加热至95℃时才开始熔化,琼脂的浓度,通常是液体培养基的1~1.5%。
另外,营养琼脂哪年的,称之前晃一晃,更匀
琼脂放的比例低了,加高一点~琼脂主要用来凝固的,不影响整个培养基
琼脂用的时候先煮,再分,这样均匀
你先要煮沸溶解培养基,稍冷后(50℃)尽快分装,我以前用5mL移液枪分装的,再把分装试管塞好灭菌。
琼脂不容易溶解,如果不高压灭菌的话类似VRBA的要复沸溶解灭菌。所以你要先煮沸溶解培养基,保证琼脂均匀的分散于溶液中,
谢谢大家的指导,用了双料煮沸溶解分装然后灭菌制斜面成功了