本人实验室新手一个，现在克隆基因遇到了瓶颈，寻求大牛帮助。
我们实验室克隆基因一般都是分三段来做，中间片段加上5’和3‘，现在有两个基因我都克隆的只剩下3’了，可是我搞了快有两个月还是做不出来，很困惑，明明很简单的东西，就是不出结果，急的很。
具体情况是这样，本来刚开始时候，PCR还能有一些非特异带，后来做的做的，连非特异带都没有了，每次跑电泳，胶上都是仅有Mark,或者偶然有些二聚体，这是什么原因，好急好急，恳请各位指点一二，

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