疑惑!CD3 CD4 CD8流式图分析
我测小鼠外周血的CD4 /CD8值,FITC-CD3、PE-CD4、APC-CD8三种抗体,一种方法是再FSC-SSC散点图中圈出淋巴细胞,再分析CD3+CD4+、CD3+CD8+。另外一种方法是在FSC-FITC-CD3散点图中圈出FITC阳性,在分析PE-APC散点图,计算CD4/CD8。
结果两种方法差的很多,差别的原因是FSC-SSC最左下角的细胞团中也有FITC阳性,是我电压没调好还是淋巴细胞设门的时候错了呀?
第一种方法:淋巴细胞设门
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第二种方法:CD3设门
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今日热帖
设门都是手动的,当然有误差
首先溶血没做好,还有很多红细胞,导致第一张图FSC/SSC上淋巴细胞群根本不明显,同时会干扰你的结果。建议溶血重做。
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电压也没调好