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WB电泳求助。疑似拖带现象

作者 Free深罙
来源: 小木虫 750 15 举报帖子
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新用户,也没几个金币,还请大家帮帮忙了。
图片是同一状态,只是背景分别为白板和黑板。
制胶板子1.5mm的,总上样量20微升(1×buffer+样品)跑的是270Kda大蛋白,分离胶8%,浓缩胶5%,90V恒压大概跑了7h,湿转法260mA恒流2h,这些从有目的条带看应该是没问题的。
5%脱脂奶粉封闭2h,一抗生工BBI的,1:500稀释(推荐200~1000),一抗4℃大约16h;二抗2h(1:2000),期间洗脱均是自配的1×TBST.
要是结果条带都跟第一条一样,我就乐呵了。  WB大神来支支招呀,靠着玩意毕业了。

WB电泳求助。疑似拖带现象
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WB电泳求助。疑似拖带现象-1
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  • 精华评论
  • Free深罙

    很捉急呀,重复多次了。这回至少能有个条带样子

  • Free深罙

    没有支招一二的么!!

  • liudayeye

    到你们宿舍了

  • liudayeye

    是不是在上样是加入了沉淀,多离心是否会改善

  • 胡棒棒.

    第一,电流大了;第二,样本上样前要离心。
                                                              来自一枚生物专业找不到工作的小硕,

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