60 nm 胶体金,浓缩,转速和时间怎么控制?
做了一点60nm的胶体金,想离心浓缩(实验室的离心机还挺好,nb的转速),让浓度变大点。
转速应该怎么控制?时间应该怎么控制?是否要在4度的低温下离心?
另外,这种纳米尺寸的颗粒,在浓缩,提纯(连接蛋白或者其他化学物质)的时候,有没有一个什么离心的标准。
比如,
20nm 转速多少,时间多少
60nm 转速多少,时间多少
100nm 转速多少,时间多少
。。。
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做了一点60nm的胶体金,想离心浓缩(实验室的离心机还挺好,nb的转速),让浓度变大点。
转速应该怎么控制?时间应该怎么控制?是否要在4度的低温下离心?
另外,这种纳米尺寸的颗粒,在浓缩,提纯(连接蛋白或者其他化学物质)的时候,有没有一个什么离心的标准。
比如,
20nm 转速多少,时间多少
60nm 转速多少,时间多少
100nm 转速多少,时间多少
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没有绝对的离心标准,要逐步去试。每次离心的量,所用离心管的形状和材质,都对离心结果有影响。
好的,谢谢
还想问个问题,胶体金调ph值的时候,为什么都是用K2CO3,为什么不用KOH呢?较低浓度的KOH也不行吗?
20nm的我现在正在离心,我都是1W转,25分钟,分离的很干净。60nm的话,5000转,8分钟就好。只是我的一些经验。不需要低温
我用20nm,试了一下您给的转速,效果很好
离心过后,往外吸上清液的时候,总会有点吸不干净(下层的颗粒还是有点溶解,上清液也还是粉红色的),这是正常的吗?
还是,您离心过后,上清液和下层的颗粒分离的非常好?
还想问个问题,胶体金调ph值的时候,为什么都是用K2CO3,为什么不用KOH呢?较低浓度的KOH也不行吗?(我试了下0.1M的KOH 没有出现沉聚)
不好意思,初做胶金,问题有点多,多谢您解答
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碳酸钾有buffer能力,氢氧化钾对pH的影响过大,不易稳定pH。
好的,谢谢!!
建议离心前先用乙醇超声离心管5分钟,然后用超纯水超声2分钟,这样金溶胶也不会附着在离心管上部。然后时间可以增加到30min。这样就会分离的更好,当然会有一点吸不干净,这是正常的。