做蛋白质纯化 该怎么脱盐
最近做原核表达，目的蛋白通过Ni柱已经收集，下一步想脱盐，但是没头绪，请各位帮忙指点一下。用G-25柱，洗脱液用什么洗脱，怎么检测目的蛋白是否出来。
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同求。。。
楼主所说的盐分是指什么？NI柱纯化的蛋白所去除一般是尿素或咪唑，对此我一般采用透析法（用PBS或Tris-HCl缓冲液作为透析液，蛋白中的盐分通过透析袋置换到透析液中），
透析，或者过分子筛，或者反复浓缩稀释。
你都自己说了用G-25除盐了还问怎么除盐
洗脱液就用你想用于保存蛋白的缓冲液
用Bradford判断目的蛋白是否出来
我们用的是PD-10柱子，是镍柱说明书给推荐的，你看下你的镍柱说明书怎么写的，检测目的蛋白可用紫外检测仪，很明显能看到一个蛋白峰和一个盐峰
根据你的蛋白大小选择合适孔径的柱子，然后不断用你的目的缓冲液超滤就可以了，如果是想要除镍的话建议先做个透析，那样效果比较好~