分光光度计检测

如果有条件的话最好用核酸测定仪,分光光度计检测误差大点

DNA纯度和浓度的检测:分光光度(紫外吸收)法

1.预热紫外分光光度计10-20分钟。
2.取所需的比色杯（4ml），其中一只装入3 mlH2O溶液，作为空白液，用来校正分光光度计零点及调整透光度至100。
3. DNA纯度及浓度的测定：
   ①取3微升的DNA样品加入比色杯，加dH2O至3000微升，混匀。
   ②将比色杯置入分光光度计中，调入射光波长，分别用空白溶液调整零点（T为100，OD为0），测待测样品在260nm、280nm、230nm的OD值。
   
③计算浓度：
         DNA浓度（ug/ml）=A260×50ug/ml×稀释倍数
对于双链DNA 1.0 OD260=50 ug/ml
对于单链RNA 1.0 OD260=40 ug/ml
4. 纯的DNA溶液其OD260/OD280应为1.8，OD260/OD230应大于2.0。
  ⑴ OD260/OD280大于1.9时，说明有RNA污染，小于1.6时表明有蛋白质或酚污染。
⑵ OD260/OD230小于2.0时，表明溶液中有残存的盐和小分子杂质，如核苷酸、氨基酸、酚，

分光光度计是一种测量的方法，
我们实验室有个eppondorf的核酸测定仪能显示OD260/OD280，OD260/OD230值还能显示浓度挺好用的。