【讨论】过柱子的问题,大伙支支招,问题还未解决
三个点,薄层挨得比较近,但是还是能分开咯,想通过过柱得到纯品(中间那个点).
过硅胶柱,200-300目,50g ,1.5g粗品
首先用的极性20:1,点1与点2有5管交叉,仅得到的点2纯品三四百毫克,东西太少了,郁闷,说明没有太分开
现在改变极性25:1,20几管中点1与点2一起下来了,看来还是没效果哈
大伙看看有什么办法?
[ Last edited by zhang_yk on 2010-7-26 at 20:39 ]
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有时候就这样，分得很开的点还一起出来呢
有什么办法呢?
要是你的样品里有碱性成分，硅胶对碱性物质吸附力强，拖尾严重
要是没有碱性物质，我觉得你就把柱子装长一点，极性不要调的太大，要适中
你没有梯度洗脱吗？先用50：1，然后25：1，然后10：1......
用制备色谱吧，东东太少啦，
是PEG高分子,可能有点拖尾,现在用的是25:1已经在降低了极性了呀,柱子以前装过一个70g 的,效果也不太好,而且洗了七八十管第二个点还没有全下来
有没有必要加入一定氨水呢,我的薄层里是加了点氨水的
，
首先只要爬板能分开，过柱就没有问題。从你的情况看来，一是你的硅胶选粗了，建议选更细的300~400目的硅胶；二是硅胶用少了，可以将柱子装长一点，技术好一些的话也更利于分开；三是洗脱剂极性可以在较小的情况下慢慢过柱。如果还是分不太开的话，建议将含回收的2点组分重新再过一下。我曾遇到你这种情况，后来就是这样反复两次才得到纯品的。