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新手弱问,免疫组化和western blot有什么区别

作者 蝶谷医仙
来源: 小木虫 150 3 举报帖子
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鄙人是实验室新手,以前只做过免疫组化,觉得操作简单,且对蛋白定性很灵敏,利用图像分析软件可以和对照组比较,现在开始学western blot,觉得好复杂啊,而且也只能定性,不明白为什么说这是半定量的方法?请问各位高手,这两种技术具体各有什么区别和优势?能否指点一二,不胜感激。

[ Last edited by 350784478 on 2009-9-3 at 08:59 ] 返回小木虫查看更多

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  • 精华评论
  • seabird06

    两者都可定量,但是各有优势!
    免疫组化的优势是可以原位显示目的蛋白的位置,而且可以用长期保存的石蜡切片来做,最近几年的TMA更是免疫组化的发展,可以同时显示几百个病例组与对照组的差别,非常直观!免疫组化主要是显示病例与对照的差别,但是用于定量不如WESTERN准确。
    Western是蛋白定量和表达的强力工具,通过对目的蛋白量上的直接测定来检测目的基因的表达,相互样品之间表达量的比较通过ACTIN等持家基因来校正,比如比较A和B两个家庭的美女多少,A家庭有2美女,共5口人,B家庭有4个美女共20口人,那显然A家庭的美女2/5大于B的1/5。当然在实际操作中我们尽量让内参表达一致,这也目的蛋白的表达量就很直观了,就是说我们两家都是10口人,这样再比较美女的多少就更直观了,

  • cauzhangtao

    是应用免疫学基本原理——抗原抗体反应,即抗原与抗体特异性结合的原理,通过化学反应使标记抗体的显色剂 (荧光素、酶、金属离子、同位素) 显色来确定组织细胞内抗原(多肽和蛋白质),对其进行定位、定性及定量的研究,称为免疫组织化学技术(immunohistochemistry)或免疫细胞化学技术(immunocytochemistry)。

  • ljbzd

    引用回帖:
    Originally posted by seabird06 at 2009-8-18 09:20:
    两者都可定量,但是各有优势!
    免疫组化的优势是可以原位显示目的蛋白的位置,而且可以用长期保存的石蜡切片来做,最近几年的TMA更是免疫组化的发展,可以同时显示几百个病例组与对照组的差别,非常直观!免疫组 ...

    你的解释太强悍了!! 问一下下再  如果做定位的话 只能用免疫组化吗?还有没有什么先进的好方法啊?

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