【求助】荧光量子产率计算,求助同时也相信对很多人有用
荧光量子产率计算
配制吸收值低于0.05的样品溶液,测试其吸收光谱及荧光光谱.荧光光谱的激发波长为400 nm,将荧光峰的积分面积F及相应的吸收值A(400 nm处的吸收值)代入如下公式:
Φx=Φs(nx/ns)2(As/Ax)(Fx/Fs)
Φ为荧光量子效率, x表示测试样品,s表示标准物质,n表示溶剂的折光指数.实验中采用的标准物为罗丹明B(荧光量子效率为90%).
首先,将罗丹明B溶解在特定溶剂(好像是乙醇,具体的你再查吧)里,获得荧光光谱(用荧光分光光度计)和吸收谱(用紫外-可见分光光度计)。这样可以获得罗丹明的积分发光强度(Fs,即对发光带进行积分)和吸收系数(As)。
随后把你自己的样品溶在一种溶剂中(溶剂选择与材料种类有关,如果与罗丹明B采用的溶剂相同,则更方便计算),同样获得荧光光谱和吸收谱,从而获得测试样品的积分发光强度(Fx)和吸收系数(Ax)
此时,nx(你采用的溶剂的折射率),ns(罗丹明B溶剂的折射率),As,Fs,Ax,Fx,以及罗丹明B的效率Φs都是已知量了,带入方程,则可以计算得到待测样品的量子效率Φx
罗丹明B(5.0μg•mL-1)为参比标准溶液(溶剂为无水乙醇);
无水乙醇在室温下的折射率为1.362
水的折射率 1.333
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以上是我搜集的资料,相信对很多人都有用。但是还有一些问题不太明白:
1)激发光波长怎么确定的,罗丹明和要测的东西是一样的吗?是只要相同就可以还是具体有什么讲究?
还是说激发波长400,测量光吸收也是400,这四个波长都是400?
2)积分发光强度就是荧光面积? 这个具体该怎么求?
3)罗丹明和要测的东西的吸光值只要小于0.05就好,还是说要尽量相似或者相同?
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其实激发波长都是400nm是错误的,你可以测罗丹明的紫外可见吸收,400nm基本吸收很小,激发时荧光很弱。罗丹明的激发波长好像是505左右,而量子点激发波长确定就要根据具体材料了,两者不可能一样的。至于积分面积,你测荧光时仪器会自动给出啊。
其实激发波长都是400nm是错误的,你可以测罗丹明的紫外可见吸收,400nm基本吸收很小,激发时荧光很弱。罗丹明的激发波长好像是505左右,而量子点激发波长确定就要根据具体材料了,两者不可能一样的。至于积分面积,你测荧光时仪器会自动给出啊。
最近做荧光量子效率也出同样的困扰 在查阅的文献当中 大多都没讲明实验的细节 主要的问题还是涉及紫外及荧光波长的选择和溶剂折光率
找到一篇比较清楚的文献 北京大学的 " 慈云祥,贾欣.荧光量子效率的简化测量方法,分析化学,1986(8):616 " 看了收获比较大,波长是选取紫外吸收图谱中标物与样品相交的平滑的曲线交点(保证A小于0.05 ) 用其进行荧光激发 发射峰不需要积分面积 可用荧光强度代替
但是我仍存在到哪查找溶液折射率的问题?希望有知道的分享下实验经验,