我最近使用Gene Finder核酸染料发现:我的Marker(宝生物公司的)老是分不开,如果按照它的说明书上配制Loading Buffer的话,Marker就是模糊一片;如果不配制,Marker直接上样,就会出现最前面的带最亮,后面的2000的,1000的就根本看不见那。真是郁闷。有谁用过,进来交流下。 返回小木虫查看更多
我把Marker稀释了24倍之后,勉强能看见Marker的各个条带,但是太弱了! 就不能比较产物的扩增效率(亮或者暗)。
我们研究所一直在用这个染料,其他实验室的也出现marker跑不好的现象,用的也是宝生物的marker。但是我自己用的也是genefinder和宝生物的marker,一直都很好。别人到我这里试了试,大概是上样缓冲液和琼脂糖的问题。我觉得最主要的是琼脂糖的强度。你可以试试台湾生工的一种琼脂糖:agarose LE, MD Bio.INC公司的。www.mdbio.com.tw 试试吧,
终于找到知音了,您能不能详细地介绍您的电泳缓冲液的配置,和琼脂糖胶的制做,还有一个上样的时候,marker是直接点两微升吗? 太感谢您了!
电泳缓冲液用的是1×TAE,按照分子克隆配制。 琼脂糖胶用的是台湾生工的产品,就是上面的那个型号,1%的胶,10%的genefinder。 marker点一微升和两微升都可以,我一般用两微升。 上样缓冲液我用的是杭州博日Taq酶赠的loading dye,大连宝生物的loading buffer也可以。每次都是一微升。
谢谢你的回复,我还想我问详细一点,你制的胶一般是多长的,也就是电泳时间跑多长的?
是跑回收胶吗?不把核酸染料加在胶里.Gene Finder核酸染料可使DNA 粘滞. 回收胶跑完后放容器里面加入100毫升TAE缓冲液,按万分之一的比例(10微升)染料,轻请摇动20分钟即可,看到的marker效果很好.
前段时间出差,没法上网。今天看到你的问题,不好意思哈 。我制的胶是120×60mm的,琼脂糖,1%。我们研究所好多实验室都用genefinder,制的胶大小不一,应该跟胶的大小没关系吧?呵呵,仅供参考。
我把Marker稀释了24倍之后,勉强能看见Marker的各个条带,但是太弱了!
就不能比较产物的扩增效率(亮或者暗)。
我们研究所一直在用这个染料,其他实验室的也出现marker跑不好的现象,用的也是宝生物的marker。但是我自己用的也是genefinder和宝生物的marker,一直都很好。别人到我这里试了试,大概是上样缓冲液和琼脂糖的问题。我觉得最主要的是琼脂糖的强度。你可以试试台湾生工的一种琼脂糖:agarose LE, MD Bio.INC公司的。www.mdbio.com.tw 试试吧,
终于找到知音了,您能不能详细地介绍您的电泳缓冲液的配置,和琼脂糖胶的制做,还有一个上样的时候,marker是直接点两微升吗?
太感谢您了!
电泳缓冲液用的是1×TAE,按照分子克隆配制。
琼脂糖胶用的是台湾生工的产品,就是上面的那个型号,1%的胶,10%的genefinder。
marker点一微升和两微升都可以,我一般用两微升。
上样缓冲液我用的是杭州博日Taq酶赠的loading dye,大连宝生物的loading buffer也可以。每次都是一微升。
谢谢你的回复,我还想我问详细一点,你制的胶一般是多长的,也就是电泳时间跑多长的?
是跑回收胶吗?不把核酸染料加在胶里.Gene Finder核酸染料可使DNA 粘滞.
回收胶跑完后放容器里面加入100毫升TAE缓冲液,按万分之一的比例(10微升)染料,轻请摇动20分钟即可,看到的marker效果很好.
前段时间出差,没法上网。今天看到你的问题,不好意思哈 。我制的胶是120×60mm的,琼脂糖,1%。我们研究所好多实验室都用genefinder,制的胶大小不一,应该跟胶的大小没关系吧?呵呵,仅供参考。