一.        光分光光度计的主要部件
    由激发光源、激发单色器(置于样品池前)和发射单色器（置于样品池后)、样品池及检测系统组成。
其结构如图所示。  
二 仪器的校正
(1)灵敏度校正：
    荧光分光光度计的灵敏度可用被检测出的最低信号来表示，或用某一对照品的稀溶液在一定激发波长光的照射下，能发射出最低信噪比时的荧光强度的最低浓度表示。
    由于影响荧光分光光度计灵敏度的因素很多，同一型号的仪器，甚至同一台仪器在不同时间操作，所得的结果也不尽相同。
因而在每次测定时，在选定波长及狭缝宽度的条件下，先用一种稳定的荧光物质，配成浓度一致的对照品溶液对仪器进行校正，即每次将其荧光强度调节到相同数值(50％或100％)。如果被测物质所产生的荧光很稳定，自身就可作为对照品溶液。紫外-可见光范围内最常用的是1 μg/ml的硫酸奎宁对照品溶液(0.05 mol/L)硫酸中。
(2)波长校正：
若仪器的光学系统或检测器有所变动，或在较长时间使用之后，或在重要部件更换之后，应该用汞灯的标准谱线对单色器波长刻度重新校正，这一点在要求较高的测定工作中尤为重要。
(3)激发光谱和荧光光谱的校正：
用荧光分光光度计所测得的激发光谱或荧光光谱往往存在较明显的误差，其原因较多，最主要的原因有：光源的强度随波长的改变而改变、每个检测器(如光电倍增管)对不同波长光的接受程度不同及检测器的感应与波长不呈线性。尤其是当波长处在检测器灵敏度曲线的陡坡时，误差最为显著。
因此，在用单光束荧光分光光度计时，先用仪器上附有的校正装置将每一波长的光源强度调整到一致，然后以表观光谱上每一波长的强度除以检测器对每一波长的感应强度进行校正，以消除误差。目前生产的荧光分光光度计大多采用双光束光路，故可用参比光束抵消光学误差。
三、荧光分析新技术简介
1．激光荧光分析 : 激光荧光法与一般荧光法的主要区别在于使用了单色性极好，强度更大的激光作为光源，因而大大提高了荧光分析法的灵敏度和选择性，特别是可调谐激光器用于分子荧光具有很突出的优点。
2．时间分辨荧光分析  是利用不同物质的荧光寿命不同，在激发和检测之间延缓的时间不同，以实现分别检测的目的。时间分辨荧光分析采用脉冲激光作为光源。如果选择合适的延缓时间，可测定被测组分的荧光而不受其他组分、杂质的荧光及噪声的干扰。目前已将时间分辨荧光法应用于免疫分析，发展成为时间分辨荧光免疫分析法。
3．同步荧光分析  在荧光物质的激发光谱和荧光光谱中选择一适宜的波长差值出△λ(通常选用与之差)，同时扫描发射波长和激发波长，得到步荧光光谱。若以值相当于或大于斯托克斯位移，就能获得尖而窄的同步荧光峰。因荧光物质浓度与同步荧光峰峰高呈线性关
系，故可用于定量分析，此法的灵敏度较高。
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