| 查看: 1393 | 回复: 8 | ||
| 当前只显示满足指定条件的回帖，点击这里查看本话题的所有回帖 | ||
liulaizhuang金虫 (正式写手)
|
[求助]
菌液PCR重复不出来 已有2人参与
|
|
| 之前做转化，挑抗性培养基上的菌落至抗性液体培养基中，摇菌后做菌落PCR，能够P出来目的条带（位于载体上），可是转接菌液至新的抗性液体培养基中，摇菌后再次PCR，未能P出目的条带？请有经验的前辈帮忙分析一下这是什么原因造成的，此外还想请教一下菌液PCR假阳性的原因是什么？ |
回复此楼» 猜你喜欢
含氟糖皮质激素的外用抗炎利器醋酸氟轻松
已经有0人回复
-
阿莫奈韦（Amenamevir）：解旋酶-引物酶靶向分子的结构特征与合成路径全解析
已经有0人回复
-
化学工程及工业化学论文润色/翻译怎么收费?
已经有152人回复
-
利瑞鲁单抗：靶向KIR的NK细胞检查点工具抗体，结构基础与科研应用全解析
已经有0人回复
-
Wnt-C59：PORCN靶向化学探针，Wnt信号通路阻断机制与科研应用全解析
已经有0人回复
-
Fexaramine：肠道限制性FXR化学探针，结构特征与信号通路研究全解析
已经有0人回复
-
NVS-STG2：靶向STING跨膜域的分子胶类激动剂，结构特征与寡聚化机制研究全解析
已经有0人回复
-
DOTA-GPC3肽（CAS 3066439-94-6）：双功能分子探针前体的结构特征与标记应用解析
已经有0人回复
-
科研用 TLR7/8 双激动剂怎么选？现货与质控要点
已经有0人回复
-
SEL120-34A HCl：CDK8/CDK19高选择性激酶抑制剂
已经有0人回复
» 本主题相关价值贴推荐，对您同样有帮助:
- 看到的一篇有关重组蛋白的纯化方法的文章，还有案例介绍说的！！
已经有2人回复
- 【求助】菌液Pcr 阳性率很低，载体双酶切后不彻底？
已经有4人回复
- 克隆基因，菌液PCR结果不理想，但想不出来原因，求助
已经有11人回复
- 大肠杆菌培养 质粒提取后困惑
已经有16人回复
- 质粒在DH5内会发生自身重组吗？
已经有2人回复
- 菌液PCR，一样的条件，再也重复不出来正确的结果了
已经有10人回复
- 折磨了一个月的测序-重叠峰问题！
已经有3人回复
- 质粒提取后dot blot技术相关问题
已经有2人回复
- 构建载体后，菌液PCR，没有目的条带！！！
已经有10人回复
- 酵母克隆PCR技术求助
已经有0人回复
- 克隆出问题了，大家帮忙分析下
已经有15人回复
- 请教：菌液pcr带总是很弱，为什么？
已经有3人回复
- 【交流】生物实验小技巧－抛玉引玉(欢迎大家分享自己的经验与技巧~~)
已经有48人回复
- 【求助/交流】假阳性是什么原因造成的？
已经有7人回复
- 【求助/交流】转化中出现的奇怪现象
已经有11人回复
9楼2015-11-06 08:40:07
2楼2015-10-21 17:44:50
★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★
感谢参与，应助指数 +1
nono2009: 金币-20, 应助指数-1, 屏蔽内容, 违规存档, 禁止回帖广告 2015-10-25 10:07:13
感谢参与，应助指数 +1
nono2009: 金币-20, 应助指数-1, 屏蔽内容, 违规存档, 禁止回帖广告 2015-10-25 10:07:13
|
本帖内容被屏蔽 |
3楼2015-10-21 20:47:10
甲方不怕乙方
木虫 (正式写手)
- 应助: 21 (小学生)
- 金币: 2733.5
- 散金: 2338
- 红花: 10
- 帖子: 460
- 在线: 125.6小时
- 虫号: 2132025
- 注册: 2012-11-17
- 性别: GG
- 专业: 水产生物营养与饲料学
|
首先假阳性就是把空载体导入了细胞中，所以也会在带有抗性的培养基上生长，但是却不带有目的片段，所以肯定P不出条带。不知道楼主是不是用已经P出目的条带的菌液进行的转接，如果是，那就重新p一次，应该不会有问题；如果不是，那就很正常了，上面说了是假阳性。所以菌落pcr要比菌液pcr成功率高很多，建议楼主以后就用菌落pcr。 发自小木虫Android客户端 |
4楼2015-10-22 12:12:14
20