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liulaizhuang金虫 (正式写手)
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[求助]
菌液PCR重复不出来 已有2人参与
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| 之前做转化，挑抗性培养基上的菌落至抗性液体培养基中，摇菌后做菌落PCR，能够P出来目的条带（位于载体上），可是转接菌液至新的抗性液体培养基中，摇菌后再次PCR，未能P出目的条带？请有经验的前辈帮忙分析一下这是什么原因造成的，此外还想请教一下菌液PCR假阳性的原因是什么？ |
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liulaizhuang
金虫 (正式写手)
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6楼2015-10-22 16:21:33
2楼2015-10-21 17:44:50
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nono2009: 金币-20, 应助指数-1, 屏蔽内容, 违规存档, 禁止回帖广告 2015-10-25 10:07:13
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3楼2015-10-21 20:47:10
甲方不怕乙方
木虫 (正式写手)
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- 专业: 水产生物营养与饲料学
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首先假阳性就是把空载体导入了细胞中，所以也会在带有抗性的培养基上生长，但是却不带有目的片段，所以肯定P不出条带。不知道楼主是不是用已经P出目的条带的菌液进行的转接，如果是，那就重新p一次，应该不会有问题；如果不是，那就很正常了，上面说了是假阳性。所以菌落pcr要比菌液pcr成功率高很多，建议楼主以后就用菌落pcr。 发自小木虫Android客户端 |
4楼2015-10-22 12:12:14
