24小时热门版块排行榜    

北京石油化工学院2026年研究生招生接收调剂公告
查看: 1489  |  回复: 10

liuxinyueer

木虫 (正式写手)

[求助] 求高手分析PCR条带 已有6人参与

我是直接拿上一次PCR产物直接做模版来这次PCR的
为什么最底下有条带?而且特别亮

求高手分析PCR条带
2015.8.25 CTPS1-FLAG 01.jpg
回复此楼

» 猜你喜欢

» 本主题相关价值贴推荐,对您同样有帮助:

欢迎讨论,小木虫未能及时回复,请邮箱: lmzhang1994@gmail.com
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
回帖支持 ( 显示支持度最高的前 50 名 )

晞朔

金虫 (正式写手)

【答案】应助回帖


感谢参与,应助指数 +1
西门吹雪170: 金币+1, 鼓励回帖交流 2015-08-25 22:46:50
看大小有可能是引物二聚体,你可以试着将引物的量减半,再P一次试试
3楼2015-08-25 14:42:43
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

673643401

铁虫 (小有名气)

【答案】应助回帖


感谢参与,应助指数 +1
西门吹雪170: 金币+1, 鼓励回帖交流 2015-08-25 22:47:10
肯定是引物二聚体 你的目的条带很弱 二聚体很亮 说明你的PCR体系有问题
4楼2015-08-25 14:47:52
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

我是鱼豆腐

金虫 (小有名气)

【答案】应助回帖


感谢参与,应助指数 +1
西门吹雪170: 金币+1, 鼓励回帖交流 2015-08-25 22:47:22
最下面那一行全是引物二聚体,引物加太多了吧,提高一下退火温度,上下游引物各0.5微升好了(25微升体系)
5楼2015-08-25 16:06:18
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
普通回帖

xiadongliang

金虫 (正式写手)

引物二聚体?
2楼2015-08-25 14:09:14
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

liuxinyueer

木虫 (正式写手)

引用回帖:
5楼: Originally posted by 我是鱼豆腐 at 2015-08-25 16:06:18
最下面那一行全是引物二聚体,引物加太多了吧,提高一下退火温度,上下游引物各0.5微升好了(25微升体系)

我是20微升体系上下游引物各加了0.4微升
欢迎讨论,小木虫未能及时回复,请邮箱: lmzhang1994@gmail.com
6楼2015-08-25 22:47:10
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

dd2531742233

新虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
引物二聚体,不是做rtpcr的话 不影响实验的

[ 发自小木虫客户端 ]
我的QQ719425242
7楼2015-08-25 23:04:31
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

535390882

铁虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
因该是一个引物二聚体,有目的带的话可以不用管它了
8楼2015-08-26 11:25:06
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

thetc

木虫 (小有名气)

引用回帖:
6楼: Originally posted by liuxinyueer at 2015-08-25 22:47:10
我是20微升体系上下游引物各加了0.4微升...

最下面是引物二聚体--- 有可能是 引物设计时的问题  本身就存在dimer等结构
引物浓度是多少 10pmol?
这个pcr  没有什么目的性啊。。。。(必要性)
加入,希望能学习多一点
9楼2015-08-26 11:51:37
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

liuxinyueer

木虫 (正式写手)

引用回帖:
9楼: Originally posted by thetc at 2015-08-26 11:51:37
最下面是引物二聚体--- 有可能是 引物设计时的问题  本身就存在dimer等结构
引物浓度是多少 10pmol?
这个pcr  没有什么目的性啊。。。。(必要性)...

20微摩尔
最上面那条条带是我的目的片段
欢迎讨论,小木虫未能及时回复,请邮箱: lmzhang1994@gmail.com
10楼2015-08-26 21:22:20
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
相关版块跳转 我要订阅楼主 liuxinyueer 的主题更新
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[考研] 081700学硕,323分,一志愿中国海洋大学求调剂学校 +16 披星河 2026-04-04 16/800 2026-04-05 11:27 by 猪会飞
[考研] 材料与化工363求推荐 +7 zh096 2026-04-04 7/350 2026-04-05 09:11 by 陌秋26
[考研] 材料求调剂 +10 呢呢妮妮 2026-04-01 10/500 2026-04-04 23:12 by 无际的草原
[考研] 本科211 分数293请求调剂 +4 莲菜就是藕吧 2026-04-01 4/200 2026-04-04 22:32 by hemengdong
[考研] 可跨专业调剂 +3 周的得地 2026-04-04 6/300 2026-04-04 22:21 by barlinike
[考研] 环境285分,过六级,求调剂 +10 xhr12 2026-04-02 10/500 2026-04-04 21:53 by bn53987
[考研] 22408,264求调剂 +3 ywh729 2026-04-03 4/200 2026-04-04 11:04 by ywh729
[考研] 0710生物学336分求调剂 +6 kiyy 2026-04-01 8/400 2026-04-04 10:10 by kiyy
[考研] 288求调剂 一志愿哈工大 材料与化工 +12 洛神哥哥 2026-04-03 12/600 2026-04-04 09:22 by 有机小民工
[考研] 求调剂 +3 wos666 2026-04-03 3/150 2026-04-04 05:16 by gswylq
[考研] 化工调剂303分,过四级 +28 栖梧待风 2026-04-02 28/1400 2026-04-03 21:40 by qlm5820
[考研] 335求调剂 +7 沈清璃 2026-04-03 7/350 2026-04-03 18:55 by lijunpoly
[考研] 320求调剂 +5 振—TZ 2026-04-02 5/250 2026-04-03 14:42 by fxue1114
[考研] 一志愿安徽大学0817化学工程与技术,求调剂 +14 我不是只因 2026-04-02 15/750 2026-04-03 09:49 by 蓝云思雨
[考研] 08工科求调剂290分 +5 1314捧花 2026-04-02 8/400 2026-04-02 13:16 by 乔哒哒哒
[考研] 材料求调剂 +10 呢呢妮妮 2026-04-01 13/650 2026-04-02 09:17 by olim
[考研] 286求调剂 +5 Sa67890. 2026-04-01 7/350 2026-04-01 19:50 by 6781022
[考研] 323分 食品与营养调剂 +3 嘿ooo 2026-03-31 3/150 2026-03-31 09:38 by longlotian
[考研] 一志愿食品科学与工程083200求调剂 +4 XQTJZ 2026-03-30 4/200 2026-03-31 04:10 by fmesaito
[考研] 297 地理学070500 复试求调剂 +3 小圆圈圈ooo 2026-03-30 3/150 2026-03-30 21:05 by 余震yz
信息提示
请填处理意见