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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » PCR相关 » 求高手分析PCR条带
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liuxinyueer

木虫 (正式写手)

[求助] 求高手分析PCR条带 已有6人参与

我是直接拿上一次PCR产物直接做模版来这次PCR的
为什么最底下有条带？而且特别亮

求高手分析PCR条带
2015.8.25 CTPS1-FLAG 01.jpg
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1楼 2015-08-25 13:03:44
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673643401

铁虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★
感谢参与，应助指数 +1
西门吹雪170: 金币+1, 鼓励回帖交流 2015-08-25 22:47:10
肯定是引物二聚体 你的目的条带很弱 二聚体很亮 说明你的PCR体系有问题
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4楼2015-08-25 14:47:52
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晞朔

金虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

★
感谢参与，应助指数 +1
西门吹雪170: 金币+1, 鼓励回帖交流 2015-08-25 22:46:50
看大小有可能是引物二聚体，你可以试着将引物的量减半，再P一次试试
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3楼2015-08-25 14:42:43
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我是鱼豆腐

金虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★
感谢参与，应助指数 +1
西门吹雪170: 金币+1, 鼓励回帖交流 2015-08-25 22:47:22
最下面那一行全是引物二聚体，引物加太多了吧，提高一下退火温度，上下游引物各0.5微升好了（25微升体系）
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5楼2015-08-25 16:06:18
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liuxinyueer

木虫 (正式写手)
引用回帖:
5楼: Originally posted by 我是鱼豆腐 at 2015-08-25 16:06:18
最下面那一行全是引物二聚体，引物加太多了吧，提高一下退火温度，上下游引物各0.5微升好了（25微升体系）

我是20微升体系上下游引物各加了0.4微升
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6楼2015-08-25 22:47:10
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