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liuxinyueer
木虫
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专业: 细胞信号转导
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求助
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求高手分析PCR条带
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我是直接拿上一次PCR产物直接做模版来这次PCR的
为什么最底下有条带?而且特别亮
2015.8.25 CTPS1-FLAG 01.jpg
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这是我跑的PCR电泳图,求高手指点!
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1楼
2015-08-25 13:03:44
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thetc
木虫
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6楼
:
Originally posted by
liuxinyueer
at 2015-08-25 22:47:10
我是20微升体系上下游引物各加了0.4微升...
最下面是引物二聚体--- 有可能是 引物设计时的问题 本身就存在dimer等结构
引物浓度是多少 10pmol?
这个pcr 没有什么目的性啊。。。。(必要性)
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9楼
2015-08-26 11:51:37
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晞朔
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2015-08-25 22:46:50
看大小有可能是引物二聚体,你可以试着将引物的量减半,再P一次试试
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3楼
2015-08-25 14:42:43
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673643401
铁虫
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2015-08-25 22:47:10
肯定是引物二聚体 你的目的条带很弱 二聚体很亮 说明你的PCR体系有问题
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4楼
2015-08-25 14:47:52
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我是鱼豆腐
金虫
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专业: 草地科学
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2015-08-25 22:47:22
最下面那一行全是引物二聚体,引物加太多了吧,提高一下退火温度,上下游引物各0.5微升好了(25微升体系)
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5楼
2015-08-25 16:06:18
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