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（木虫生物专题讨论）之核酸提取纯化专题贴
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———————————————————————————————— 继续招帖子工，招聘链接：http://muchong.com/bbs/viewthread.php?tid=910794&fpage=1 ——————————————————————————————————— 不才经过半个多月的整理，核酸提取纯化专题终于完成了。 本专题共分两篇 一为技巧篇 二为解惑篇 其中每篇分别整理成三章： DNA，RNA（含mRNA）和质粒。 请各位多多支持！ 如果你觉得你从中学到了一点东西， 就把它顶起来吧， 让更多的人从中获益~    [ Last edited by raindrop8316 on 2008-8-19 at 08:44 ] |
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 原创 | 关于RNA | 经验 | 音乐的梦 |
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第一章 DNA提取与纯化 主题11：土样中DNA的提取 链接：http://muchong.com/bbs/viewthread.php?tid=156607&fpage=271 解答1：annpc5 附件1：DNA recovery from soils of diverse composition 附件2：直接从土壤中提取DNA得方法 主题12：提取DNA时，PVP聚乙烯基吡咯烷酮的作用? 链接：http://muchong.com/bbs/viewthread.php?tid=479437&fpage=258 解答1：发如雪 聚乙烯吡咯烷酮 分子式：(C6H9NO)n 一、性质： 粉末或水溶液，易溶于水及多种有机溶剂，具有良好溶解性，生物相溶性，生理惰性，成膜性，胶体保护能力和与多种有机、无机化合物复合的能力，对酸、盐及热较稳定。 二、用途： 在化妆品工业中作为分散剂、成膜剂、增稠剂、润滑剂及粘合剂，在医药工业中是药用合成新辅料之一，可用作片剂、颗粒的粘结剂、缓释剂。注射剂的助剂和稳定剂、胶囊的助流剂，液体制剂及着色剂的分散剂，酶及热敏药物的稳定剂，难溶药物的共沉淀剂，眼药的延效剂及润滑剂和包衣成膜剂等；在涂料、颜料、塑料树脂、玻璃纤维、油墨、粘合剂、净洗剂、摄影胶卷、压片、电视显像管、生产药水、胶布、消毒剂、纸张、纺织印染等方面用 作助剂。 解答2：anlewo7777 PVP可与多种物质，特别是含羟基、羧基、氨基及其他含活性氢的化合物或单质形成络合物，例如，它可与许多毒素、病毒、医药及毒性化学品形成络合物，以减少其毒性和刺激性。 与少数几种物质（如多元酚）的络合力很强，在中性及酸性物质中，形成沉淀。这种特性可从溶液和饮料中除去多元酚和花色素氰。但使用不溶性 PVP效果更好。 解答3：分子进化 主要是除多酚类物质 主题13：桃的DNA提取（果冻样沉淀） 链接：http://muchong.com/bbs/viewthread.php?tid=488559&fpage=253 解答1：lyl0807 加NaAc试试 解答2：tiny20022005 先用无CTAB的缓冲液洗涤匀浆能较好去除多糖 解答3：randomqd 把离心的速度调高些 解答4：hallhowe 离心后去掉异丙醇，再加入乙醇沉淀，再离心。离心要高速，4度 解答5：Doublel 杂质应该是树胶类物质，桃的果实中含量很多的。 主题14：请问怎样去除DNA提取产物中的色素等物质？ 链接：http://muchong.com/bbs/viewthread.php?tid=499180&fpage=250 解答1：cdl007 你提的是DNA，可以用玻璃棒挑出来再溶到另一个管里 多漂洗几次，应该能去掉很多杂质 这个方法最简单而且不用引入新的污染 还可以采用非可溶性PVP（polyvinylpyrrolidone）研磨样品， PVP能络合多酚类物质，不但能较彻底防止氧化作用，而且能有效的去除多糖和色素，色素是PCR反应中的强抑制剂，一定要除掉 主题15：提取一种微型动物DNA 链接：http://muchong.com/bbs/viewthread.php?tid=538532&fpage=223 解答1：xiaopu_yin 估计一些常规的方法你都试过，有没有想过在溶液中加几丁质酶，消化一部分虫体壁？ 解答2：glucidum 如果LZ只是需要提取一点点DNA 来做PCR,进行系统分析的话.建议试试在解剖镜下直接用镊子碾碎虫体然后加入蛋白酶消化处理。消化处理的溶液即可直接用做PCR,不需要再做沉淀处理等等。 解答3：陈硕真 超声破碎或高速球磨等机械方法肯定能够破碎，用研磨也可以 解答4：dajiahaoma Evaluation of extraction methods for the isolation of dust mites 7种提取方法 （附件下载） |
8楼2008-08-15 17:25:41
I．技巧篇
2楼2008-08-15 17:13:35
3楼2008-08-15 17:15:07
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第三章 质粒提取与纯化 主题1：质粒DNA的分离纯化和鉴定 链接：http://muchong.com/bbs/viewthread.php?tid=142066&fpage=418 发帖人：okaysee 主题2：一步法提取质粒DNA 链接：http://muchong.com/bbs/viewthread.php?tid=202040&fpage=398 发帖人：aronxu 主题3：质粒DNA提取及琼脂糖凝胶电泳 链接：http://muchong.com/bbs/viewthread.php?tid=417117&fpage=295 发帖人：raoqun20 主题4：质粒DNA提取试验常见问题解答 链接：http://muchong.com/bbs/viewthread.php?tid=462010&fpage=270 发帖人：beingking 主题5：质粒DNA的分离、纯化和鉴定 链接：http://muchong.com/bbs/viewthread.php?tid=543443&fpage=219 发帖人：lgj7966 主题6：转一篇关于质粒DNA提取原理的很棒的文章 链接：http://muchong.com/bbs/viewthread.php?tid=772205&fpage=71 发帖人：wjswj 以下为付费下载部分 主题7：质粒DNA的提取及浓度检测 链接：http://muchong.com/bbs/viewthread.php?tid=595213&fpage=189 发帖人：applepie119 主题8：质粒快速提取试剂盒 链接：http://muchong.com/bbs/viewthread.php?tid=595209&fpage=189 发帖人：applepie119 主题9：质粒DNA的提取和纯化 链接：http://muchong.com/bbs/viewthread.php?tid=102712&fpage=429 发帖人：pzhangyh 主题10：质粒提取简介及问题分析 链接：http://muchong.com/bbs/viewthread.php?tid=666139&fpage=141 发帖人：yangym1123 |
4楼2008-08-15 17:17:49