24小时热门版块排行榜    

Znn3bq.jpeg
查看: 680  |  回复: 2
当前主题已经存档。

youyou1013

[交流] 请问怎样去除DNA提取产物中的色素等物质?

各位论坛的朋友们,你们好!
我有几个堆肥土壤样品,在用它们进行DNA提取(采用的方法是蛋白酶K-CTAB联合提取)的时候,发现整个上清液一直颜色呈很深的褐色,用氯仿-异戊醇后颜色还是不减。我再用异丙醇和PEG8000进行两次纯化,得到的DNA溶液颜色还是很深。PCR根本进行不下去!

我觉得可能是我的土壤样品含有太多杂质,导致色素等物质过多,请教各位论坛的朋友,有没有很好的去除这些色素的办法呢?

敬请各位赐教!
回复此楼

» 猜你喜欢

已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

cdl007

木虫 (正式写手)

你提的是DNA,可以用玻璃棒挑出来再溶到另一个管里
多漂洗几次,应该能去掉很多杂质
这个方法最简单而且不用引入新的污染

还可以采用非可溶性PVP(polyvinylpyrrolidone)研磨样品, PVP能络合多酚类物质,不但能较彻底防止氧化作用,而且能有效的去除多糖和色素,

色素是PCR反应中的强抑制剂,一定要除掉

[ Last edited by cdl007 on 2007-6-11 at 16:21 ]
2楼2007-06-11 16:15:37
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

youyou1013

嗯!谢谢这位朋友,我用你刚刚说的两种方法试试实验效果的!

另外就是,我用十分之一10%的CTAB/0.7NaCl以及三分之一体积的氯仿沉淀,离心后基本上上清液基本呈无色,再用无水乙醇沉淀过夜,获得的DNA基本没有了!

这种方法对DNA损失很大吗?但是我也看过其他很多人有做过这样的实验啊。
3楼2007-06-11 16:36:23
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
相关版块跳转 我要订阅楼主 youyou1013 的主题更新
普通表情 高级回复 (可上传附件)
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[考研] 274求调剂求调剂 +11 Jachenbingoo 2026-04-06 14/700 2026-04-11 11:37 by 紫曦紫棋
[考研] 296求调剂 +13 汪!?! 2026-04-10 15/750 2026-04-11 10:31 by 逆水乘风
[考研] 一志愿东北大学控制工程085406数二英二385,求调剂 +8 Ezra_Zhang 2026-04-09 8/400 2026-04-11 09:15 by 猪会飞
[考研] 368求调剂 +3 17385968172 2026-04-10 3/150 2026-04-10 20:12 by 电子奥德彪
[考研] 吉大计算机技术331分,英语六级,求调剂 +3 峰峰021116 2026-04-09 3/150 2026-04-10 20:01 by chemisry
[考研] 一志愿中科大070300化学,314分求调剂 +12 wakeluofu 2026-04-09 12/600 2026-04-10 09:57 by liuhuiying09
[考研] 08600生物与医药-327 +10 18755400796 2026-04-05 10/500 2026-04-10 08:14 by kangsm
[考研] 085601初试330分找调剂 +10 流心奶黄包l 2026-04-09 10/500 2026-04-10 08:14 by Sammy2
[考研] 一志愿华工085600 331分 +6 天下ww 2026-04-09 6/300 2026-04-09 18:59 by l_paradox
[考研] 367求调剂 +10 hffQAQ 2026-04-09 10/500 2026-04-09 18:06 by lijunpoly
[考研] 一志愿中国科学院上海有机所,有机化学356分找调剂 +11 Nadiums 2026-04-09 11/550 2026-04-09 18:04 by lijunpoly
[考研] 一志愿鲁东大学071000生物学学硕初试分数276求调剂 +3 慕绝cc 2026-04-09 3/150 2026-04-09 09:57 by liuhuiying09
[考研] 材料考研求调剂总分280 +30 mkjlz1 2026-04-06 35/1750 2026-04-08 21:25 by cyh—315
[考研] 275 求调剂 +8 Lei812514 2026-04-07 8/400 2026-04-08 12:46 by chemisry
[考研] 11408 325分 +3 jgtxuxgkx 2026-04-07 3/150 2026-04-07 23:10 by lbsjt
[考研] 22408 调剂材料 +7 我叫ez 2026-04-06 8/400 2026-04-07 17:12 by 蓝云思雨
[考研] 085100建筑学 寻求跨专业调剂 一志愿南大294分 校级省级国家级奖项若干 踏实肯干 +3 1021075758 2026-04-06 4/200 2026-04-07 09:23 by 蓝云思雨
[考研] 生物与医药求调剂 +7 heguanhua 2026-04-05 8/400 2026-04-06 18:41 by macy2011
[考研] 一志愿河北工业大学材料工程,初试344求专硕调剂 +6 15933906766 2026-04-05 6/300 2026-04-06 13:21 by 无际的草原
[考研] 一志愿武汉理工大学080200机械工程308分,求调剂 +4 终不似从前 2026-04-05 4/200 2026-04-06 11:46 by 考研学校招点人
信息提示
请填处理意见