| 查看: 1230 | 回复: 2 | |||
| 当前主题已经存档。 | |||
forest200195木虫 (正式写手)
|
[交流]
总 RNA 的非变性电泳检测
|
||
|
?? RNA ??????????????? Lambda DNA/EcoR I ?????? Hind III????? Marker???????????????? Marker ????????????????????????裬????? 1-1.2%????????????? (?????????Ψ????????????????????)?? ????????? 2-3cm ????????????????????????????????????????λ??(???????????)???????????????????????????????? (???????)???????????? (??????????)??????? 23kb ??????????? (?????? DNA ???????)?????????????????????????????????????????????????????????????????γ????????????????????????????????й?????????????й??????????????й???????в????и????????????????й?????????????й? (??????????????????????)???????????????????????????????м?????????? ???????????????????λ??? 1?????????????????λ????????С??? rRNA (5S ??)???????????????????п????У????????С???в????????????????????? TRIzol ????γ???????????????????С?? RNA ??Ρ? ???????????????????????????????????????????????????????????????????????????????????Щ???????????ж????????????????? RNA????????????Σ?????С??η???????????????????????????????Σ????ж??? 2?????????????????????????????????????λ???????????ε? rRNA (28S/18S ??)???????????????????????????????????????????????????䶮 ??????????????? 2:1?????????????????б?????????????????????????????????????????Щ?????????????????????? (?? DXY ????????????)?????????????????????????? ????????ж????????????????????????Щ???? ?C ????? ?C ?????????ж???????????????????á???????????????????????????????????????????? RNA ???????????????? (????????????)???????????????????????κ???? ????????????????????????????С????? (????????????????)?????С????β?????????????????????С??η???????? 1?? ?????????????????С??β?????????????????????С??η???????? 1????????????????????????????????????????????β?????????????????????????????????????????? ?????壺?????????????????????????????????????????й????????????????????Σ????ж??? ?????????????? DNA Marker ????С?????ж? RNA ????????С????????????????????????????????????? 28S ???? 2kb λ?????н?? 1kb λ???????????????????????????????й??????????????????????????????????????????????????ò???????????? 1kb ???????????????????????????????????? RNA ??????????????? DNA Ladder ?C ??????????????? 3??23kb ???????λ????????????? DNA ????????????????????? DNase I ???????κη?????????? RNA ???????л????? DNA????????????????????? ??????????????????????????????? DNA ??????????????/????й????????????????й????????????????????????????????????? DNA ????????????????TRIzol ???????????????????/???????????? DNA ???????????????????й???????????????????????й?? ???????????????????????????????????л????? DNA ????????????????????????????????????????????????????????????????????????????????????????β??????????????????????档 4????????????λ??????????????????????????????????????????????????????????????/???????????????? (?????????) ?????????????????????????????????????????????????????????й? (?????????????????ε?)????????????????/????????Щ??????????й????????????????????????????????й? (?缡??)??????????????????/?????????????????й???????????ù????????????????? 5?????????????????????????????κ?λ?á?????????????????????????????? (????β) ?????????????е??????й?????????????????β?????????????????????????????????????????????????????????????????????? ?ж??????????????????????????????????????????????????????????????????????????????????????????ж??????????????????????????????????????ж??????????????????????????????????? ???????? TAE ??TBE ???????????????? 50x TAE Buffer (Tris-Acetate-EDTA) 242 gm Tris base 57.1 ml Acetic acid 100ml 0.5M EDTA Add ddH2O to 1 liter and adjust pH to 8.5. 10x TBE Buffer (Tris-Borate-EDTA) 108 gm Tris base 55 gm Boric acid 9.3 gm Na4EDTA Add ddH2O to 1 liter. The pH is 8.3 and requires no adjustment. ????????e?????м??? 1. TBE ?????? (??????? 10 times)????? borate ????????????????????????????????????????}?? 2. TBE ?? buffering capacity ?? TAE ????? TBE ????????? gel??????? (resolution) ????^??? 3. ??? TBE ?? borate ???? (ion)?????????? (enzyme) ?????????????????????? DNA ?????????????????? cloning ?? restriction cut ?????????м????? DNA ???? borate ion?? 4. TAB ?? buffer capacity ????gel ?????^????????????????????????? RNA????????? ??????????????????????mRNA?????????RNA???????????????????????????????RNA???????е??????????????????????????????????RNA???????????????????????????????????????RNA??????????????о????RNA??????????Щ??????䶮??????о?????о??????????????Щ???????????????????????????????е?????????????????? ?????? RNA???????? ????????????RNA???????е???? ??????????? ?????粻???????????????RNA??????????????????RNA????? ?????????????????????????????????????????????????????????RNA???????????????????????????????RNA???????????????????????????????????RNA????????????????180 ??????С??????????????????????????????????????????????????0.1 ??????????????DEPC???????????????????RNA????????????????????DEPC??RNA????????????????????ò??????????Fedorcsak??Ehrenberg,1966????????DEPC?????????????????37??????С??????????????????Σ?????100????15?????Kumar??Lindberg,1972)????15 lbf/in2(1.034x105Pa)??????????15??????????????????????????????DEPC?????DEPC??????????????RNA???????????????Ρ? ????????????RNA???????????з???Ч?????????????????д???????????????Σ????????γ?DNA??RNA??RNA??RNA??????????????????????????RNA???????????????????????????????????????????????3????H2O2??????????·???10??????????0.1 ??DEPC???????????????????????????????Щ????????????????????????????????????????????RNA?????á? ???????о??????????? RNA??????????????????о???????????????????????????RNA?????????????????漰RNA????в????????У??????????????????? ?????????????????????????????????????RNA?????????RNA????????????? ??????????????????????????RNA?о???????????????????????????????????????????????RNA???????????????????????0.1??DEPC?? 37?????????12С????????100?????15???????15lbf/in2(1.034x105Pa)?????????????15????????DEPC??????????????????????Щ????????????????Tris ????????????漸????δ?????Tris???????????RNA???????? ??????RNA???????? ?????????????????????RNA???????? ??????RNA???????????????????????????????????????RNA????????KI??3x1010???γ?ǹ?????????????????RNA???䶮????????????????????????????????????????????????????к???????????????RNA????????????????????????????????????????????????????????????????????5mmol/L???????????DTT????50???????У????????20?档???????????????κ??????????????????????????????????????????????????????????????RNA????????????????????鶯???????????RNA?????????в??????????????????????????????????????????????????????????????????RNA?????????о???д????????????????????????????????????????????????в???????????????????????????????????????????????????????mRNA???????????е???? ??????????????????????????????????1V???????4??????????е???????????γ????????????????????????????????RNA?????????????????????RNA???????????????????????????????????????У???RNA?????????????й????У????????????10mmol/L?????????mRNA???????????????н??з??? ????????Щ???????????mRNA??????????塣??????????????????????????mRNA???????????е???????????ú?0.1 ????????????[ ??0. 01mol/LTris.Cl(pH7.8)???]??γ????????????м????????????????????????? ??????Macaloid?????????Macaloid?????????????????????????????RNA??????????????????????0.015????W/V????????????????? ????????????????????RNA??????????RNA?????????У?????????????????? (????????????????RNA???????е???? ?????????????????????????????????????????????????????????飬???????????????????????????????????????RNA???????????????????????????????????????У??縻??RNA????????У?????????????RNA???????????????????RNA???????????????????RNA????й?????????????????????з?????RNA??????RNA??????? RNA?? |
回复此楼» 猜你喜欢
科研人必读：新一代 KRAS G12C 抑制剂 Olomorasib 的研究进展
已经有0人回复
-
BT-11（Omilancor）研究化合物全解析：从分子结构到实验应用要点
已经有0人回复
-
化学工程及工业化学论文润色/翻译怎么收费?
已经有122人回复
-
富马酸贝达喹啉：二芳基喹啉类工具化合物的化学特征
已经有0人回复
-
BT投稿with editor状态快两周了，正常吗
已经有25人回复
-
Silevertinib（BDTX-1535）结构拆解：炔基双环片段为何成为合成瓶颈
已经有0人回复
-
RO4929097 解析：双苯并氮杂䓬骨架与 Notch 通路实验设计要点
已经有0人回复
-
分子量 1157 的 PROTAC 怎么配不析出：SGK3-PROTAC1 的溶解、分装与图谱复核
已经有0人回复
-
logP 6.1 的羧酸怎么配母液：GSK 650394 的溶解窗口与稀释顺序
已经有0人回复
-
从"水不溶"到 71 mg/mL：雷特格韦的 pH 依赖溶解与螯合色谱边界
已经有0人回复
-
133 Ų 的极性表面积，如何决定 TNG462 的母液配制与色谱条件
已经有0人回复
» 本主题相关商家推荐: (我也要在这里推广)
haiven
捐助贵宾 (著名写手)
- MolEPI: 2
- 应助: 18 (小学生)
- 金币: 7057.7
- 帖子: 1121
- 在线: 291.5小时
- 虫号: 237714
- 注册: 2006-04-04
- 性别: GG
- 专业: 生物物理、生物化学与分子
2楼2007-05-26 15:31:18
