24小时热门版块排行榜    

Znn3bq.jpeg
查看: 1101  |  回复: 2
当前主题已经存档。

forest200195

木虫 (正式写手)

[交流] 总 RNA 的非变性电泳检测

?? RNA ??????????????? Lambda DNA/EcoR I ?????? Hind III????? Marker???????????????? Marker ????????????????????????裬????? 1-1.2%????????????? (?????????Ψ????????????????????)?? ????????? 2-3cm ????????????????????????????????????????λ??(???????????)???????????????????????????????? (???????)???????????? (??????????)??????? 23kb ??????????? (?????? DNA ???????)?????????????????????????????????????????????????????????????????γ????????????????????????????????й?????????????й??????????????й???????в????и????????????????й?????????????й? (??????????????????????)???????????????????????????????м??????????
???????????????????λ???
1?????????????????λ????????С??? rRNA (5S ??)???????????????????п????У????????С???в????????????????????? TRIzol ????γ???????????????????С?? RNA ??Ρ?
???????????????????????????????????????????????????????????????????????????????????Щ???????????ж????????????????? RNA????????????Σ?????С??η???????????????????????????????Σ????ж???
2?????????????????????????????????????λ???????????ε? rRNA (28S/18S ??)???????????????????????????????????????????????????䶮
??????????????? 2:1?????????????????б?????????????????????????????????????????Щ?????????????????????? (?? DXY ????????????)??????????????????????????
????????ж????????????????????????Щ???? ?C ????? ?C ?????????ж???????????????????á???????????????????????????????????????????? RNA ???????????????? (????????????)???????????????????????κ????
????????????????????????????С????? (????????????????)?????С????β?????????????????????С??η???????? 1??
?????????????????С??β?????????????????????С??η???????? 1????????????????????????????????????????????β??????????????????????????????????????????
?????壺?????????????????????????????????????????й????????????????????Σ????ж???
?????????????? DNA Marker ????С?????ж? RNA ????????С????????????????????????????????????? 28S ???? 2kb λ?????н?? 1kb λ???????????????????????????????й??????????????????????????????????????????????????ò???????????? 1kb ???????????????????????????????????? RNA ??????????????? DNA Ladder ?C ???????????????
3??23kb ???????λ????????????? DNA ????????????????????? DNase I ???????κη?????????? RNA ???????л????? DNA?????????????????????
??????????????????????????????? DNA ??????????????/????й????????????????й????????????????????????????????????? DNA ????????????????TRIzol ???????????????????/???????????? DNA ???????????????????й???????????????????????й??
???????????????????????????????????л????? DNA ????????????????????????????????????????????????????????????????????????????????????????β??????????????????????档
4????????????λ??????????????????????????????????????????????????????????????/???????????????? (?????????) ?????????????????????????????????????????????????????????й? (?????????????????ε?)????????????????/????????Щ??????????й????????????????????????????????й? (?缡??)??????????????????/?????????????????й???????????ù?????????????????
5?????????????????????????????κ?λ?á?????????????????????????????? (????β) ?????????????е??????й?????????????????β??????????????????????????????????????????????????????????????????????
?ж??????????????????????????????????????????????????????????????????????????????????????????ж??????????????????????????????????????ж???????????????????????????????????
???????? TAE ??TBE ????????????????
50x TAE Buffer (Tris-Acetate-EDTA)
242 gm Tris base
57.1 ml Acetic acid
100ml 0.5M EDTA
Add ddH2O to 1 liter and adjust pH to 8.5.
10x TBE Buffer (Tris-Borate-EDTA)
108 gm Tris base
55 gm Boric acid
9.3 gm Na4EDTA
Add ddH2O to 1 liter.
The pH is 8.3 and requires no adjustment.
????????e?????м???
1. TBE ?????? (??????? 10 times)????? borate ????????????????????????????????????????}??
2. TBE ?? buffering capacity ?? TAE ????? TBE ????????? gel??????? (resolution) ????^???
3. ??? TBE ?? borate ???? (ion)?????????? (enzyme) ?????????????????????? DNA ?????????????????? cloning ?? restriction cut ?????????м????? DNA ???? borate ion??
4. TAB ?? buffer capacity ????gel ?????^?????????????????????????
RNA?????????
??????????????????????mRNA?????????RNA???????????????????????????????RNA???????е??????????????????????????????????RNA???????????????????????????????????????RNA??????????????о????RNA??????????Щ??????䶮??????о?????о??????????????Щ???????????????????????????????е??????????????????
??????
RNA????????
????????????RNA???????е????

???????????
?????粻???????????????RNA??????????????????RNA?????
?????????????????????????????????????????????????????????RNA???????????????????????????????RNA???????????????????????????????????RNA????????????????180 ??????С??????????????????????????????????????????????????0.1 ??????????????DEPC???????????????????RNA????????????????????DEPC??RNA????????????????????ò??????????Fedorcsak??Ehrenberg,1966????????DEPC?????????????????37??????С??????????????????Σ?????100????15?????Kumar??Lindberg,1972)????15 lbf/in2(1.034x105Pa)??????????15??????????????????????????????DEPC?????DEPC??????????????RNA???????????????Ρ?
????????????RNA???????????з???Ч?????????????????д???????????????Σ????????γ?DNA??RNA??RNA??RNA??????????????????????????RNA???????????????????????????????????????????????3????H2O2??????????·???10??????????0.1 ??DEPC???????????????????????????????Щ????????????????????????????????????????????RNA?????á?
???????о??????????? RNA??????????????????о???????????????????????????RNA?????????????????漰RNA????в????????У??????????????????? ?????????????????????????????????????RNA?????????RNA?????????????
??????????????????????????RNA?о???????????????????????????????????????????????RNA???????????????????????0.1??DEPC?? 37?????????12С????????100?????15???????15lbf/in2(1.034x105Pa)?????????????15????????DEPC??????????????????????Щ????????????????Tris ????????????漸????δ?????Tris???????????RNA????????
??????RNA????????
?????????????????????RNA????????
??????RNA???????????????????????????????????????RNA????????KI??3x1010???γ?ǹ?????????????????RNA???䶮????????????????????????????????????????????????????к???????????????RNA????????????????????????????????????????????????????????????????????5mmol/L???????????DTT????50???????У????????20?档???????????????κ??????????????????????????????????????????????????????????????RNA????????????????????鶯???????????RNA?????????в??????????????????????????????????????????????????????????????????RNA?????????о???д????????????????????????????????????????????????в???????????????????????????????????????????????????????mRNA???????????е????
??????????????????????????????????1V???????4??????????е???????????γ????????????????????????????????RNA?????????????????????RNA???????????????????????????????????????У???RNA?????????????й????У????????????10mmol/L?????????mRNA???????????????н??з??? ????????Щ???????????mRNA??????????塣??????????????????????????mRNA???????????е???????????ú?0.1 ????????????[ ??0. 01mol/LTris.Cl(pH7.8)???]??γ????????????м?????????????????????????
??????Macaloid?????????Macaloid?????????????????????????????RNA??????????????????????0.015????W/V????????????????? ????????????????????RNA??????????RNA?????????У??????????????????
(????????????????RNA???????е????
?????????????????????????????????????????????????????????飬???????????????????????????????????????RNA???????????????????????????????????????У??縻??RNA????????У?????????????RNA???????????????????RNA???????????????????RNA????й?????????????????????з?????RNA??????RNA??????? RNA??
回复此楼

» 猜你喜欢

» 本主题相关商家推荐: (我也要在这里推广)

已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

haiven

捐助贵宾 (著名写手)

非常感谢楼主!!!!
走进你,温暖我,迷失于这个世界!
2楼2007-05-26 15:31:18
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
相关版块跳转 我要订阅楼主 forest200195 的主题更新
普通表情 高级回复 (可上传附件)
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[考研] 291求调剂 +7 关忆北. 2026-04-11 7/350 2026-04-11 23:48 by baobaoye
[考研] 296求调剂 +8 汪!?! 2026-04-09 8/400 2026-04-11 21:02 by 逆水乘风
[考研] 11408。358求调剂 +3 TMYzds 2026-04-07 3/150 2026-04-11 17:10 by 氮气气气
[考研] 308求调剂 +3 VvvvL 2026-04-10 3/150 2026-04-11 15:32 by xiangxu
[考研] 求调剂 +6 archer.. 2026-04-09 8/400 2026-04-11 10:55 by zhq0425
[考研] 0854调剂 +4 长弓傲 2026-04-09 4/200 2026-04-11 09:18 by 猪会飞
[考研] 080500求调剂 +17 黄宇博 2026-04-06 17/850 2026-04-11 08:36 by zhq0425
[考研] 083200 305分 求二轮调剂 不接受跨专业 +9 Claireyyyy 2026-04-09 10/500 2026-04-10 21:21 by Claireyyyy
[考研] 298求调剂 +13 钉叮咚冬瓜 2026-04-09 13/650 2026-04-10 15:49 by jiajinhpu
[考研] 282,电气工程专业,求调剂,不挑专业 +9 jggshjkkm 2026-04-10 9/450 2026-04-10 14:55 by 逆水乘风
[考研] 一志愿 江南大学 085602 化工专硕 338分求调剂 +16 路痴小琪 2026-04-05 16/800 2026-04-10 08:08 by kangsm
[考研] 337求调剂 +4 Gky09300550, 2026-04-09 4/200 2026-04-09 17:18 by 帕尔马拉特
[考研] 材料工程调剂 +12 小刘同学吖吖 2026-04-06 13/650 2026-04-09 17:07 by luoyongfeng
[考研] 一志愿985初试354分生物调剂 +3 031001 2026-04-06 3/150 2026-04-09 00:30 by Evan_Liu
[考研] 388求调剂 +6 四川王涛 2026-04-07 8/400 2026-04-08 00:17 by JourneyLucky
[考研] 一志愿西电085401求调剂 +4 sunw1306 2026-04-07 4/200 2026-04-07 16:40 by 啵啵啵0119
[考研] 软工学硕299求调剂 +6 useryy 2026-04-07 6/300 2026-04-07 09:50 by vgtyfty
[考研] 生物学学硕求调剂:351分一志愿南京师范大学生物学专业 +6 …~、王…~ 2026-04-06 7/350 2026-04-06 18:54 by macy2011
[考研] 085405软件工程301分求调剂,专硕可跨专业,四六级已过 +3 静静想想 2026-04-05 3/150 2026-04-06 15:23 by nepu_uu
[考研] 专硕304找调剂,一线城市最好 +3 李lsl李 2026-04-05 3/150 2026-04-06 12:16 by ffffjjjj
信息提示
请填处理意见