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forest200195

木虫 (正式写手)

[交流] 总 RNA 的非变性电泳检测

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50x TAE Buffer (Tris-Acetate-EDTA)
242 gm Tris base
57.1 ml Acetic acid
100ml 0.5M EDTA
Add ddH2O to 1 liter and adjust pH to 8.5.
10x TBE Buffer (Tris-Borate-EDTA)
108 gm Tris base
55 gm Boric acid
9.3 gm Na4EDTA
Add ddH2O to 1 liter.
The pH is 8.3 and requires no adjustment.
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1. TBE ?????? (??????? 10 times)????? borate ????????????????????????????????????????}??
2. TBE ?? buffering capacity ?? TAE ????? TBE ????????? gel??????? (resolution) ????^???
3. ??? TBE ?? borate ???? (ion)?????????? (enzyme) ?????????????????????? DNA ?????????????????? cloning ?? restriction cut ?????????м????? DNA ???? borate ion??
4. TAB ?? buffer capacity ????gel ?????^?????????????????????????
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haiven

捐助贵宾 (著名写手)

非常感谢楼主!!!!
走进你,温暖我,迷失于这个世界!
2楼2007-05-26 15:31:18
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