| 查看: 958 | 回复: 3 | |||
| 当前主题已经存档。 | |||
[交流]
一步法提取质粒DNA
|
|||
|
一步法提取质粒DNA主要用于鉴定阳性克隆。 主要步骤如下： 收集1.5mL菌体，彻底除去培养基； 加入50ulSTE缓冲液重悬菌体； 加入50ul酚：氯仿;异戊醇（25：24：1），混匀； 12000rpm离心5分钟，取上清到另一离心管中； 加入NH4Ac至终浓度2M，并加入2倍体积的乙醇，混匀，室温或冰上放置几分钟； 12000rpm离心5分钟，弃上清，75%乙醇清沉淀； 沉淀干后，以水或TE缓冲液溶解，便可进行酶切等操作。 这种方法提到的质粒中，也有部分基因组DNA，但不影响酶切检测鉴定，但是某些要求严格的实验不能采用这种方法。 |
回复此楼» 猜你喜欢
调剂
已经有6人回复
-
290求调剂
已经有11人回复
-
0854调剂
已经有9人回复
-
267求调剂
已经有8人回复
-
材料与化工300求调剂
已经有42人回复
-
310求调剂
已经有9人回复
-
调剂求收留
已经有22人回复
-
材料工程日语考生求调剂
已经有7人回复
-
26自然地理学303分求调剂
已经有11人回复
-
271求调剂
已经有16人回复
jinhx87
至尊木虫 (知名作家)
- 应助: 48 (小学生)
- 金币: 28184.7
- 红花: 6
- 帖子: 6691
- 在线: 1213.2小时
- 虫号: 81315
- 注册: 2005-07-19
- 专业: 微生物遗传育种学
2楼2006-03-10 06:54:36
3楼2006-03-10 09:01:19
4楼2006-03-15 12:23:19
20