24小时热门版块排行榜

返回列表

当前只显示满足指定条件的回帖，点击这里查看本话题的所有回帖

肉肉-rourou

铁虫 (初入文坛)

应助: 0 (幼儿园)
金币: 32.5
散金: 13
帖子: 14
在线: 9.6小时
虫号: 3546614
注册: 2014-11-19
专业: 作物分子育种

[交流] pcr 不出目的条带已有4人参与

半个月前设计的引物，用DNA跑出条带后，送去测序，与设计的相吻合。可是最近跑PCR，只有质粒出，DNA一个条带都不出，不知道什么原因，是需要改变体系么？怎么改体系呢？新手，谢谢啦！用过两个体系尝试，如下：
反应体系：20                体系2：20
dNTP  0.5                   dNTP 0.4
Buffer  0.5                   Buffer  2
ddH2O  13.5                ddH2O  10.4
上游引物  2                上游引物：1.5
下游引物  2                下游引物：1.5
DNA  1                         DNA 4

untitled.png

回复此楼

» 猜你喜欢

» 本主题相关价值贴推荐，对您同样有帮助:

PCR扩增不出目的条带，求分析原因已经有12人回复
PCR就是不出目的条带！！！！已经有11人回复
求助pcr扩增扩不出目的条带已经有6人回复
救命啊RT-PCR不出目的条带，关于血糖的。已经有1人回复
反转录后PCR扩不出目的条带已经有26人回复
PCR扩不出目的条带已经有4人回复
cDNA验证，PCR不出目的条带的原因已经有5人回复
菌落PCR有目的条带，质粒提取后质量良好，可是质粒PCR却没有目的条带已经有4人回复
PCR 目的条带出不来已经有2人回复
融合PCR扩增不出目的条带已经有3人回复
PCR扩增不出目的条带已经有12人回复
不知道为什么用猪的肠道的cDNA 一直都无法PCR出目的条带已经有6人回复
PCR不出目的条带的原因已经有12人回复
质粒ＰＣＲ扩不出目的条带，且有杂带，但是直接测序有结果？为什么？？？？？已经有7人回复
PCR一直扩不出目的条带已经有10人回复
PCR大量扩增不出目的条带已经有3人回复

1楼 2015-07-17 13:58:04

已阅回复此楼关注TA 给TA发消息送TA红花 TA的回帖

肉肉-rourou

铁虫 (初入文坛)

应助: 0 (幼儿园)
金币: 32.5
散金: 13
帖子: 14
在线: 9.6小时
虫号: 3546614
注册: 2014-11-19
专业: 作物分子育种

引用回帖:

2楼: Originally posted by great07225388 at 2015-07-17 17:09:53
是以前跑pcr能出结果，现在跑，出不来了吗？如果是，模板可能降解了，建议下次把模板跑个胶看看有没有降解。或者什么东西加错了，或者上下游引物忘了加其中的一个，等等。先排除主观原因，再排除客观原因。祝实验顺 ...

是啊，之前有的。排除了东西忘加的问题，东西也都换过新的。模板是最近新提取的，应该没有降解啊。。。