应《网络安全法》要求，自2017年10月1日起，未进行实名认证将不得使用互联网跟帖服务。为保障您的帐号能够正常使用，请尽快对帐号进行手机号验证，感谢您的理解与支持！

24小时热门版块排行榜    

小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » PCR相关 » pcr 不出目的条带
51/1返回列表
查看: 845  |  回复: 7
只看楼主 @他人 存档 新回复提醒 (忽略) 收藏    在APP中查看
当前只显示满足指定条件的回帖，点击这里查看本话题的所有回帖

肉肉-rourou

铁虫 (初入文坛)

[交流] pcr 不出目的条带 已有4人参与

半个月前设计的引物，用DNA跑出条带后，送去测序，与设计的相吻合。可是最近跑PCR，只有质粒出，DNA一个条带都不出，不知道什么原因，是需要改变体系么？怎么改体系呢？新手，谢谢啦！用过两个体系尝试，如下：
反应体系：20                 体系2：20
dNTP  0.5                     dNTP   0.4
Buffer  0.5                    Buffer  2
ddH2O  13.5                 ddH2O  10.4
上游引物  2                   上游引物：1.5
下游引物  2                   下游引物：1.5
DNA  1                          DNA   4

pcr 不出目的条带
untitled.png
回复此楼

» 猜你喜欢

» 本主题相关价值贴推荐，对您同样有帮助:
1楼 2015-07-17 13:58:04
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

没想好名字

新虫 (初入文坛)
★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
话说你的酶呢？dntp和buffer各2ul，引物1ul，模板你就要做个梯度试一下了
赞一下 回复此楼
3楼2015-07-19 09:04:11
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
查看全部 8 个回答

great07225388

新虫 (著名写手)
★ ★ ★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
西门吹雪170: 金币+2, 鼓励回帖交流 2015-07-17 22:58:08
是以前跑pcr能出结果，现在跑，出不来了吗？如果是，模板可能降解了，建议下次把模板跑个胶看看有没有降解。或者什么东西加错了，或者上下游引物忘了加其中的一个，等等。先排除主观原因，再排除客观原因。祝实验顺利！

[ 发自小木虫客户端 ]
赞一下(1人) 回复此楼
2楼2015-07-17 17:09:53
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

肉肉-rourou

铁虫 (初入文坛)
引用回帖:
3楼: Originally posted by 没想好名字 at 2015-07-19 09:04:11
话说你的酶呢？dntp和buffer各2ul，引物1ul，模板你就要做个梯度试一下了

酶忘记写了。。。之前跑出来的模板不可以直接用么？
赞一下 回复此楼
4楼2015-07-20 14:05:52
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

肉肉-rourou

铁虫 (初入文坛)
引用回帖:
2楼: Originally posted by great07225388 at 2015-07-17 17:09:53
是以前跑pcr能出结果，现在跑，出不来了吗？如果是，模板可能降解了，建议下次把模板跑个胶看看有没有降解。或者什么东西加错了，或者上下游引物忘了加其中的一个，等等。先排除主观原因，再排除客观原因。祝实验顺 ...

是啊，之前有的。排除了东西忘加的问题，东西也都换过新的。模板是最近新提取的，应该没有降解啊。。。
赞一下 回复此楼
5楼2015-07-20 14:08:59
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
查看全部 8 个回答
普通表情 龙 兔 虎 猫 高级回复 (可上传附件)
信息提示
关闭
请填处理意见
关闭