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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 干扰/敲除 » 有没有人在一个质粒上引入多个终止子和启动子的？
汕头大学海洋科学接受调剂
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piaobo7776

新虫 (初入文坛)

[交流] 有没有人在一个质粒上引入多个终止子和启动子的？

最近做反义RNA对基因knockdown，想利用一个质粒对多个基因进行干扰，这样需要把每个反义RNA分隔开转录，有没有人试过在一个质粒上引入多个终止子和启动子的，例如：Promoter-asRNA1-terminator-Promoter-asRNA2-terminator。这样可行么？
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1楼 2015-07-12 09:21:25
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ladtalent

至尊木虫 (著名写手)
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piaobo7776(西门吹雪170代发): 金币+1, 鼓励回帖交流 2015-07-14 22:45:11
原核的质粒是可以的 以前我就看过类似的文献 自己也构建过 现在手边没有相关文献 Promoter-asRNA1-terminator-Promoter-asRNA2-termina 这样的结构我推测可以 以前我用的是共表达的功能基因 所以我觉得这样也可以 如果有什么其他问题可以一起讨论~
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10楼2015-07-14 12:46:02
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luciferwcw

新虫 (初入文坛)
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piaobo7776(西门吹雪170代发): 金币+1, 鼓励回帖交流 2015-07-14 22:45:25
这个是没有问题的，但是在载体构建的时候最好做成Promoter-asRNA1-terminator-Terminator-asRNA2-Promoter形式，防止上游启动子干扰下游基因表达。
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11楼2015-07-14 15:07:18
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dmbb
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piaobo7776(金币+1): 谢谢参与
2楼2015-07-12 09:29:06
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落花剑雨
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piaobo7776(金币+1): 谢谢参与
3楼2015-07-12 09:32:37
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shenrenren
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piaobo7776(金币+1): 谢谢参与
4楼2015-07-12 09:44:15
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假大空
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5楼2015-07-12 09:50:17
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tzynew
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6楼2015-07-12 09:58:48
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evil丶zero

金虫 (小有名气)
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小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
我没有做过，但是问一下，你应该是原核的吧，多个终止子是什么类型呢？我觉得多个终止子可能会对基因组的表达有影响
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7楼2015-07-12 15:17:13
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kangaroo0513

新虫 (正式写手)
对这个问题很有兴趣，待高手解答，最好附上protocol或者pdf文献。。哇咔咔。。谢谢啦。。
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8楼2015-07-12 18:56:28
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piaobo7776

新虫 (初入文坛)
引用回帖:
7楼: Originally posted by evil丶zero at 2015-07-12 15:17:13
我没有做过，但是问一下，你应该是原核的吧，多个终止子是什么类型呢？我觉得多个终止子可能会对基因组的表达有影响

是原核的，整合型游离型质粒都有

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9楼2015-07-12 22:52:15
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