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piaobo7776

新虫 (初入文坛)

[交流] 有没有人在一个质粒上引入多个终止子和启动子的?

最近做反义RNA对基因knockdown,想利用一个质粒对多个基因进行干扰,这样需要把每个反义RNA分隔开转录,有没有人试过在一个质粒上引入多个终止子和启动子的,例如:Promoter-asRNA1-terminator-Promoter-asRNA2-terminator。这样可行么?
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ladtalent

至尊木虫 (著名写手)

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piaobo7776(西门吹雪170代发): 金币+1, 鼓励回帖交流 2015-07-14 22:45:11
原核的质粒是可以的 以前我就看过类似的文献 自己也构建过 现在手边没有相关文献 Promoter-asRNA1-terminator-Promoter-asRNA2-termina 这样的结构我推测可以 以前我用的是共表达的功能基因 所以我觉得这样也可以 如果有什么其他问题可以一起讨论~
10楼2015-07-14 12:46:02
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luciferwcw

新虫 (初入文坛)

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piaobo7776(西门吹雪170代发): 金币+1, 鼓励回帖交流 2015-07-14 22:45:25
这个是没有问题的,但是在载体构建的时候最好做成Promoter-asRNA1-terminator-Terminator-asRNA2-Promoter形式,防止上游启动子干扰下游基因表达。
11楼2015-07-14 15:07:18
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普通回帖

piaobo7776(金币+1): 谢谢参与
2楼2015-07-12 09:29:06
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piaobo7776(金币+1): 谢谢参与
3楼2015-07-12 09:32:37
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piaobo7776(金币+1): 谢谢参与
5楼2015-07-12 09:50:17
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piaobo7776(金币+1): 谢谢参与
6楼2015-07-12 09:58:48
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evil丶zero

金虫 (小有名气)


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我没有做过,但是问一下,你应该是原核的吧,多个终止子是什么类型呢?我觉得多个终止子可能会对基因组的表达有影响
7楼2015-07-12 15:17:13
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kangaroo0513

新虫 (正式写手)

对这个问题很有兴趣,待高手解答,最好附上protocol或者pdf文献。。哇咔咔。。谢谢啦。。
8楼2015-07-12 18:56:28
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piaobo7776

新虫 (初入文坛)

引用回帖:
7楼: Originally posted by evil丶zero at 2015-07-12 15:17:13
我没有做过,但是问一下,你应该是原核的吧,多个终止子是什么类型呢?我觉得多个终止子可能会对基因组的表达有影响

是原核的,整合型游离型质粒都有

[ 发自小木虫客户端 ]
9楼2015-07-12 22:52:15
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