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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 生物科学 » 层析/纯化 » 蛋白纯化（二聚体）
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我要睡觉

新虫 (小有名气)

[求助] 蛋白纯化（二聚体） 已有1人参与

大家好！我在做一个蛋白，但是在表达的过程中，跑胶出来的分子量大了一倍，想说是不是二聚体，如果是的话我应该接着纯化么？如果最后纯化出来了怎么把二聚体分开？谢谢~~~~因为才开始做，很多地方都不懂，所以上来求助各位！
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1楼 2015-07-07 08:58:07
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a86052

金虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★ ★
感谢参与，应助指数 +1
我要睡觉: 金币+6 2015-07-07 11:24:47
跑的SDS-PAGE吗？这种情况下蛋白二聚体不被打开的还是不是很多见的。表达量大吗？建议采用其他方法鉴定下，比如western blot之类的~
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2楼2015-07-07 09:37:44
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我要睡觉

新虫 (小有名气)
是的，在SDS-PAGE胶上能看到明显的条带。那如果检测出来全是二聚体我还用继续往下面纯化么？还是说把二聚体把和目的蛋白分开（前提是有目的蛋白达），然后只纯化目的蛋白就好了。是不是我们对二聚体完全没有办法？
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3楼2015-07-07 11:24:38
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a86052

金虫 (正式写手)
商家已经主动声明此回帖可能含有宣传内容
引用回帖:
3楼: Originally posted by 我要睡觉 at 2015-07-07 11:24:38
是的，在SDS-PAGE胶上能看到明显的条带。那如果检测出来全是二聚体我还用继续往下面纯化么？还是说把二聚体把和目的蛋白分开（前提是有目的蛋白达），然后只纯化目的蛋白就好了。是不是我们对二聚体完全没有办法？

你应该查询下相关的文献，如果该蛋白本身就以二聚体形式发挥功能，那么直接纯化就可以了啊~还有就是有些蛋白本身有些修饰，跑出来的大小偏大不少也是可能的~
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4楼2015-07-07 12:04:11
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我要睡觉

新虫 (小有名气)
引用回帖:
4楼: Originally posted by a86052 at 2015-07-07 12:04:11
你应该查询下相关的文献，如果该蛋白本身就以二聚体形式发挥功能，那么直接纯化就可以了啊~还有就是有些蛋白本身有些修饰，跑出来的大小偏大不少也是可能的~...

好的，谢谢~~~还要学习啊~~呵呵呵
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5楼2015-07-07 13:14:44
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