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蛋白质大小和形态鉴定方法
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xulinan
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专业: 微生物生理与生物化学
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蛋白质大小和形态鉴定方法
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蛋白质可能存在单体、二体和多聚体的形式,目前想判断纯化的一个蛋白是单体还是二体,或是多聚体。尝试了分子排阻色谱,峰位出现在二体位置,但是有人提出这种方法受到分子形态影响太大,不能单凭峰位判断。而同位素标记蛋白打质谱的方法又太费时费力。请问是否有其他简单可行的办法可以判断单体还是双体的。谢谢
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王传胜
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专业: 生物大分子结构与功能
【答案】应助回帖
★ ★ ★
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xulinan: 金币+3,
★★★
很有帮助, 谢谢回复
2015-07-07 12:10:53
做个交联,然后跑个电泳应该可以确定
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2015-07-07 11:46:19
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2楼
:
Originally posted by
王传胜
at 2015-07-07 11:46:19
做个交联,然后跑个电泳应该可以确定
多谢建议,交联后电泳似乎解决了蛋白自身形态的干扰,但仍有疑问请教下:交联是否有机会引起两个原本单体的分子变成双体或多聚体,从而引入误差?交联后再煮样变性,是否有单体条带,也就是说变性后是否会出现交联不稳定,双体变单体的情况?交联剂那种效果好些? 如有这方面的经验,请指点一些,谢谢。
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3楼
2015-07-07 12:17:34
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